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本研究通过细胞培养及构建卡培他滨致手足综合征的大鼠模型,揭示仙方活命饮对卡培他滨致手足综合征治疗作用及机理。首先体外培养人永生化表皮细胞(HACAT细胞),用氟尿嘧啶做细胞毒性试验,获得细胞生存率50%时5-氟尿嘧啶(5-Fu)的最佳剂量为3.5μmmol,约1.8μL原液;在后续细胞培养中分别加入1.8μL 5-FU药液,1.8μL5-FU+不同剂量梯度的仙方活命饮药液以及仙方活命饮药液,24 h后CCK8法(Cell Counting Kit-8)检测细胞生存率,酶联免疫吸附法(ELISA)测细胞培养上清液中细胞因子含量。细胞生存率检测结果显示:加入1.8μL5-Fu后的细胞生存率约为正常的50%,在仙方活命饮药液量为4μL时,细胞生存率达到高峰,当添加1.8μL 5-FU+4μL仙方活命饮药液时,细胞的生存状态最佳,生存率接近100%。细胞培养上清液细胞因子检测结果与正常细胞组相比显示,细胞+1.8μL5-Fu组CNTF、PD-ECGF、CINC-3、IL-10、IL-β表达量明显增高;细胞+4μL中药药液组CINC-3、IL-10、CNTF表达量降低;细胞+5-Fu+4μL中药药液组PD-ECGF、IL-β降低,CINC-3、CNTF、IL-10明显增高。手足综合征(Hand-foot syndrome,HFS)制模与评价:选用SD雌性大鼠115只,按实验需求分为a、b、c、d、e、f六组,a组以200mg/kg/次,卡培他滨灌胃连续7天,2次/天,休息3天。b组在a组基础上再灌胃7天,方法同a组,c组400 mg/kg/次,灌胃连续7天,2次/天,休息3天,连续2个周期。d、e组为去离子水组,f组为正常对照组。通过一般状况评估,大鼠足跖部特征图像对比,HE及天狼猩红染色等方法对比综合评价所建立手足综合征模型。结果显示a组HFS的发生率为40%,b组总的发病率可达到77.5%,c组的HFS发病率可达到80%。经统计学分析,a组与b、c两组相比HFS发病率存在显著差异(p<0.05),但b组与c组相比HFS发病率无显著差异(p>0.05)。b组建立模型状态良好、造模成功率高(77.5%)、稳定性好。选用SD雌性大鼠150只,用200 mg/kg/次卡培他滨的造模方法模拟不同剂量致HFS的模型,分为一周期模型(A组)和两周期模型(B组),然后将模型大鼠分别分为中药内服组(A1,B1)、中药外用组(A2,B2)、尿素维E护肤霜外用组(A3,B3)、不给药组(A4,B4),干预时间为1周。不同时间点观察足跖部皮肤变化,取大鼠后足跖部组织,病理切片、HE染色、天狼猩红染色、胸苷磷酸化酶(TP)免疫组化;留取大鼠血清,检测部分细胞因子表达量。结果显示A组各干预组间HFS好转率差异不大,而B组中药外用组HFS好转率明显高于其他各组。A1、A2、A3、A4局部皮损好转大鼠与无效大鼠相比,各细胞因子浓度差异不明显。B1、B2、B3、B4无效大鼠与好转大鼠相比细胞因子表达(CNTF、PD-ECGF、CINC-3、IL-10、IL-β)各有差异,但CNTF表达量均相比较高,且B2(中药外用组)CINC-3、CNTF较其他组表达量降低。A组HFS(+)干预后好转大鼠、HFS(+)干预后无效大鼠、正常对照组大鼠间TP表达阳性率无明显差别(p>0.05),但各组TP表达阳性率均大于A组HFS(-)大鼠(p<0.05)。B组HFS(+)干预后好转大鼠、HFS(+)干预后无效大鼠、正常对照组大鼠间无明显差别(p>0.05),但各组TP表达阳性率均大于B组HFS(-)大鼠(p<0.05)。本研究可得出以下结论:1、仙方活命饮可促进细胞修复,具有对抗5-FU造成的细胞损伤效应的作用;2、200 mg/kg/次,2/日卡培他滨灌胃,给药2周期能够建立质量较高的卡培他滨诱导手足综合征的大鼠模型;3、损伤-炎性反应-损伤机制与HFS的发生密切相关;4、仙方活命饮治疗HFS具有良好疗效,且外用较内服疗效更佳;5、CNTF可作为预测HFS发生及疗效的指标;6、TP表达阳性率高的大鼠更易发生HFS,仙方活命饮对于TP表达没有影响;7、短时间、小剂量情况下出现HFS时,停用卡培他滨可使临床症状消失,而长时间、大剂量情况下出现的HFS必须予以其他干预措施,传统医学采取清热解毒,行气活血治法可取得显著疗效,而现代医学治疗原则应以减少炎性损伤及修复神经损伤为主。