【摘 要】
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本研究为了探索月季RcAP2基因对植物生长发育和环境胁迫的影响,构建基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的植物双元表达载体。以拟南芥作为受体材料,应用农杆菌介导法对拟南芥花序进行侵染转化,获得了表达eGFP（enhanced Green Fluorescent Protein）的拟南芥转化植株;以月季作为受体材料,优化了月季植株再生体系;采用农杆菌介导法对月季胚性愈伤组织、月季茎段芽进行侵染转化
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本研究为了探索月季RcAP2基因对植物生长发育和环境胁迫的影响,构建基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的植物双元表达载体。以拟南芥作为受体材料,应用农杆菌介导法对拟南芥花序进行侵染转化,获得了表达eGFP（enhanced Green Fluorescent Protein）的拟南芥转化植株;以月季作为受体材料,优化了月季植株再生体系;采用农杆菌介导法对月季胚性愈伤组织、月季茎段芽进行侵染转化试验,获得了表达eGFP的月季腋芽和叶片,进行了月季RcAP2基因编辑研究,并得到以下主要结论:1.本研究基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,根据月季RcAP2基因的保守序列,筛选了一对靶位点基因,利用PCR技术将目的片段连接到pKSE402载体中,经测序后,表明含月季RcAP2基因的植物表达载体构建成功。2.以月季茎段腋芽作为试验材料,通过2,4-D为主要生长调节剂的诱导,优化了月季再生体系。3.以拟南芥为受体材料,采用农杆菌介导法对拟南芥花序进行侵染转化,并获得表达eGFP的拟南芥转化植株。4.以月季胚性愈伤、月季茎段芽为受体材料,农杆菌介导法对伤口进行侵染,获得了月季转化植株,并在月季腋芽和叶片上检测出绿色荧光。
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