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前言: 增食欲素作为一种新型的神经肽，包括增食欲素A(orexinA，OXA)和增食欲素B(orexin B，OXB)，均来源于共同的增食欲素前原，通过刺激受体:增食欲素受体1(orexin receptor1，OX1R)和增食欲素受体2(orexin receptor2，OX2R)发挥多种生物学效应，这两种受体均为G蛋白偶联受体。增食欲素受体主要存在于下丘脑组织，但在胰腺、脂肪、肾脏、肾上腺、睾丸等组织也有表达，并产生相应的生物学效应。主要功效是参与食物摄入、睡眠-觉醒行为、觉醒、内分泌代谢、能量平衡和能量消耗等。OXA和OXB已有相关报告与细胞凋亡和抗凋亡功能相关，其中OXA可以充当调节肽参与细胞增殖和细胞凋亡。已有研究显示大鼠胰腺组织有OXA、OX1R的表达，说明OXA及其受体OX1R在胰岛细胞功能调节方面发挥着作用。多项研究表明:AKT丝氨酸/苏氨酸激酶（也称为蛋白激酶B）是真核细胞中的关键信号分子;AKT-缺失的小鼠可因胰岛β细胞凋亡增加导致细胞数量明显减少，最终导致血糖升高;然而持续活化的AKT可导致胰岛β细胞数量及质量的增加。而目前关于OXA及其受体OX1R对胰岛β细胞增殖、凋亡的影响及其信号通路的研究尚未见报道。OXA及受体在胰岛细胞上表达并促进胰岛素分泌的分子机制尚不完全清楚。 实验方法: 大鼠INS-1细胞在体外培养，暴露于不同浓度OXA，并设立几个实验组，包括OX1R拮抗剂(SB334867)、PI3K拮抗剂（渥曼青霉素）或AKT拮抗剂(PF-04691502)，并设立空白对照。ELISA法测定培养液中胰岛素分泌的浓度;MTT法检测细胞增殖;凋亡试剂盒检测细胞凋亡;实时定量PCR法检测胰岛细胞信号转导通路(PI3K/AKT) mRNA的表达情况;western-blot技术检测细胞OX1R蛋白表达及AKT总蛋白及磷酸化蛋白水平。 实验结果: OXA（10-10至10-6 M）可刺激INS-1细胞的增殖和活化，抑制细胞凋亡，并增加INS-1细胞胰岛素的分泌;OXA（10-10至10-6M）增加INS-1细胞内信号蛋白AKT的磷酸化水平;OX1R拮抗剂SB334867(10-6 M)，PI3K拮抗剂渥曼青霉素(10-8 M)，AKT拮抗剂PF-04691502(10-6 M)，或两者的组合，可以抑制OXA的促INS-1细胞分泌胰岛素的作用。 结论: OXA可能通过OXA/OX1R/AKT通路调节INS-1细胞的胰岛素分泌功能。