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目的:创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)发病率较高,目前为止仍然具有较高的致残率和死亡率,对治疗颅脑损伤后继发性炎性改变、血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)破坏、脑水肿等继发性损伤的研究仍然停滞不前,导致致残率和死亡率无法得到进一步改善。因此,TBI后继发性损伤仍然是目前为止需遏待解决的难题。丙戊酸钠(valproic acid VPA)为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI),对多种癫痫发作均有效。最近研究表明,VPA在肿瘤抑制、双向情感障碍、偏头痛方面、失血性休克复苏和中枢神经系统疾病治疗中亦具有保护作用,特别是在TBI后神经保护应用方面显示出巨大前景,但目前其发挥在神经系统保护作用的剂量存在较大争论。本实验通过研究不同剂量丙戊酸钠(valproic acid VPA)对实验性大鼠创伤性颅脑损伤后的保护作用,探讨合适的给药剂量以及研究其相关保护机制。实验方法:1、取成年雄大鼠100只,采用控制性皮层撞击损伤(controlled cortical impact CCI)建立大鼠创伤性颅脑损伤模型,随机分成5组(n=20)。Sham组,TBI组,TBI+30mg VPA组,TBI+150mg VPA组,TBI+300mg VPA组。TBI+30mg VPA、TBI+150mg VPA、TBI+300mg VPA组分别于TBI造模清醒后每天行胃饲VPA30mg/kg、150mg/kg、300mg/kg,连续7天,Sham、TBI组给予胃饲等体积生理盐水。2、每一组20只大鼠分别按术后24h、3d、7d、14d时间点处死分成4个亚组,每组5只,分别行改良神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,mNSS),并抽取颈内静脉血检测VPA血药浓度,处死断头取脑后于挫伤处脑组织行H-E染色观察脑挫伤灶和免疫组化法测水通道蛋白4(AQP4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、载脂蛋白J(ApoJ),并行蛋白免疫印迹法(western-blot)测AQP4、MMP-9、ApoJ含量和采用干湿重法行脑组织含水测定。结果:1、与Sham组比较,伤后1、3、7、14天,TBI组mNSS评分均升高,差异具有统计学意义(P<0.05),且伤后第1、3、7、14天后mNSS评分逐渐下降呈好转趋势;与TBI组相比,伤后第1、3、7、14天,TBI+150mg VPA组、TBI+300mg VPA组的mNSS评分均下降,差异具有统计学意义(P<0.05),其中以TBI+300mg VPA组下降最明显;与TBI组相比,TBI+30mgVPA组的改良神经功能缺损评分变化无统计学意义;2、与Sham组比较,TBI组在伤后1、3、7天的脑组织含水量升高,差异具有统计学意义(P<0.05),伤后第14天各组间脑组织含水量差异无统计学意义;与TBI组相比,伤后第1、3、7天,TBI+150VPA、TBI+300VPA组的脑组织含水量在明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),各组间比较,以TBI+300mg VPA组下降最明显;与TBI组相比,伤后14天,各给药组间,脑组织含水量差异无统计学意义(P>0.05);在伤后各时间点,TBI+30mg VPA组与TBI组相比脑组织含水量差异均无统计学意义(P>0.05);3、与Sham组比较,TBI组MMP-9表达在术后1d开始增加,3d达到峰值,7d、14d未见明显阳性表达;与TBI组相比较,TBI+VPA组在术后1、3天脑组织MMP-9表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05),给药剂量越高,下降越明显,差异具有统计学意义(P<0.05);在14d各给药组未见明显MMP-9阳性表达。4、与Sham组比较,TBI组AQP4表达在术后24h最高,3d开始下降,7d、14d回到基值;与TBI组相比较,TBI+VPA组在术后1、3d天脑组织AQP4表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05),给药剂量越高,下降越明显,差异具有统计学意义(P<0.05),术后7、14d天各组脑组织AQP4表达差异不具有具有统计学意义。5、与Sham组比较,TBI组ApoJ表达在1d开始增加,3d表达仍然较高,7d开始下降,14d回到正常;与TBI组相比较,TBI+VPA组在术后1、3d脑组织ApoJ表达均下降,差异具有统计学意义(P<0.05),给药剂量越高,下降越明显,差异具有统计学意义(P<0.05),术后第14d,各实验组间脑组织ApoJ表达无差异;结论:1、丙戊酸钠可以减轻脑损伤模型大鼠的脑水肿,保护神经元细胞,对大鼠脑损伤模型具有脑保护作用;2、丙戊酸钠可以抑制大鼠脑损伤模型脑组织中ApoJ、AQP4、MMP-9蛋白表达,在30mg/kg、150mg/kg、300mg/kg/d剂量研究中显示,剂量越大,其抑制作用越明显。3、VPA的脑保护作用可能是VPA抑制脑损害因子表达和抑制脑保护因子表达共同作用的结果。4、大剂量丙戊酸钠对大鼠脑损伤模型脑保护作用中更有优势,但应避免药物中毒反应。