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目的:
1、锯叶棕提取物对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。
2、通过锯叶棕提取物对人脑胶质瘤细胞的干预,观察人脑胶质瘤细胞中PI3K蛋白的表达。
试验方法:
体外培养U251细胞,应用叶棕提取物进行预处理,应用TUNEL法检测细胞凋亡,应用WesternBlot法检测PI3K蛋白表达水平变化。
结果:
1、TUNEL法染色检测锯叶棕提取物对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。
(1)24h组与48h组均可见TUNEL阳性反应细胞即凋亡细胞,胞体缩小,形态不规则,胞核固缩浓染,呈棕黄色或棕褐色;48h组与24h组比较,凋亡细胞数量显著增多(F=14.720,P=0.000)(见表1-1、图1-1、图1-2);
(2)对照组偶见凋亡细胞,2.0μl/mL给药组与1.5μl/mL给药组比较,凋亡细胞数量显著增多(三组资料比较:F=24.434,P=0.000;1.5μl/mL组与2.0μl/mL组比较,F=27.234,P=0.007)(见表1-2、图1-1、图2-2);
2、用WestemBlot法检测锯叶棕提取物对人脑胶质瘤细胞P13K蛋白表达的影响。
锯叶棕提取物预处理U251细胞组与对照组比较,P13K蛋白表达水平显著降低(t=6.849,P=0.000)(见表2、图2-1、图2-2);
结论:
1、锯叶棕提取物能诱导人脑胶质瘤细胞凋亡。
2、锯叶棕提取物诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的机制可能是通过阻断PI3K/Akt信号转导通路。