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目的:甲型流感病毒抗原性易发生变异,曾多次引起全球性的大爆发,2009年全世界范围内流行的甲型H1N1流感病毒就是一种新的甲型流感病毒变异株。人群对甲型H1N1流感病毒普遍易感,尤其是妊娠期女性,易感程度是非妊娠人群的2-4倍,同时妊娠期女性也是较易成为重症病例的高危人群。尽管目前甲型H1N1流感病毒的流行已基本宣告结束,但由于流感病毒抗原漂移的特征,每年不同亚型的流感病毒仍在不同地区有着不同规模的流行,时刻威胁着人类的健康,也正是由于流感病毒抗原的易漂移性,使我们对流感病毒进行有针对性的研究时缺少感染病毒亚型较为一致的研究对象及资料。本实验选择2009年甲型H1N1流感患者作为研究对象,旨在通过检测甲型H1N1流感患者血清中几种较能反应患者免疫状态的细胞因子及抗H1N1免疫球蛋白IgG亚型的水平,进一步分析甲型H1N1流感病毒对患者尤其是妊娠期女性患者免疫状态的影响。
方法:
选择2009年11月14日至2009年12月31日中国医科大学附属盛京医院收住院的确诊为甲型H1N1肺炎患者53例。在2009年甲型H1N1流感流行期间,中国医科大学附属盛京医院门诊及急诊收治的流感样病例均取鼻咽拭子,由辽宁省疾病控制中心进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)病原学检测,只有病原学确诊并伴有肺炎的病例收住入院,轻症病例行居家隔离治疗。收住院的53例患者中,妊娠期女性患者17例,非妊娠期女性患者17例,男性患者19例,另收集同时期抗甲型H1N1特异性IgG抗体阳性健康妊娠期女性15例,健康体检者女性18例男性10例,均无甲型H1N1流感发病史。
采用ELISA法检测各组细胞因子及血清特异性IgG及亚类的百分结合率及构成比;白细胞总数及中性粒细胞百分比采用美国贝克曼公司LH750血液分析仪进行检测;CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分比采用美国BD公司产品FACSCalibur流式细胞仪进行检测。
结果:
病例组与对照组相比,WBC总数无显著性差异,病例组中性粒细胞百分比显著增高。与对照组相比,病例组IFN-γ及IL-10显著增高;IL-4显著降低,P<0.05。
与甲流非妊娠组相比,甲流妊娠组中同时出现CD4+T细胞百分率、CD4+T细胞/CD8+T细胞比率的降低及CD8+T细胞百分率的升高,P<0.05。甲流妊娠组IFN-γ水平显著高于妊娠对照组。甲流妊娠组IL-10水平显著高于甲流非妊娠组和妊娠对照组,P<0.05。
各组特异性IgG均以IgG1亚类为主,与甲流非妊娠组相比,甲流妊娠组的IgG1,IgG2,IgG3亚类百分构成比下降,P<0.05;与妊娠对照组相比,妊娠病例组IgG2,IgG4亚类百分构成比下降,P<0.05。
结论:
对于单纯的重症甲型H1N1流感患者特异性体液免疫受到了不同程度的抑制,而妊娠合并重症甲型H1N1流感患者免疫应答的改变可能包括细胞免疫的抑制和体液免疫的失衡,这些会增加妊娠期女性对感染性疾病的敏感性和严重程度。