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仔猪水肿病是一种较常见的传染病，能引起断奶仔猪四肢麻痹、步态蹒跚、痉挛和昏迷等神经症状，死亡率很高。剖检可见胃壁和肠系膜水肿，因此称之为“水肿病”。F107（F18ab）菌毛与类志贺毒素Ⅱ型变异体（SLT-Ⅱe）是致仔猪水肿病的产Vero细胞毒素大肠杆菌的两个毒力因子，因此研究两者的关系对预防和诊断仔猪水肿病有非常重要的意义。 将表达F107菌毛的107／86标准株在TSB培养基中37℃培养两代，每代24h，经电镜观察确认菌毛大量表达，灭活后作为免疫原免疫BALB／C小鼠。另外，在实验室保存的水肿病菌株中挑选一株O抗原与标准株不同，但也能很好表达菌毛的菌株培养后作为检测抗原包被ELISA板。细胞融合后经间接ELISA、玻板凝集、免疫印迹等方法检测，得到3株阳性杂交瘤细胞，命名为F7-1、2F7-2、H7，制得的单抗腹水ELISA效价分别为216、214、210，试管凝集价分别为：1：5120、1：1024、1：512。免疫印迹结果显示，三株单抗都可和F107菌毛及8199菌株的F18ac菌毛的提取物反应，表明单抗是针对F18菌毛“a”因子抗原的。将实验室保存的18株水肿病菌株的TSB培养物，离心悬浮后，菌液分别与100倍稀释的单抗F7-1做玻板凝集反应，结果表明有71％（12／17）的菌株表达F107菌毛。 由于SLT-Ⅱe较难提纯，因此本实验利用原核表达的SLT-ⅡeB亚单位融合蛋白，经谷胱苷肽活化的Sepharose 4B亲和层析柱提纯后测定浓度，作为免疫原免疫小鼠。以经诱导表达融合蛋白的重组菌、未经诱导不表达融合蛋白的重组菌及只表达载体蛋白的重组菌三者的裂解产物包被ELISA板，细胞融合后培养基上清经检测得到1株针对B亚单位的阳性克隆，命名为7C3-1，制备的单抗腹水ELISA效价为210，可中和SLT-Ⅱe的Vero细胞毒性，在免疫印迹中只与B亚单位融合蛋白反应，而对载体蛋白不反应。利用此单抗经斑点ELISA检测18株水肿病菌株，有13株产生SLT-Ⅱe。 SLT-Ⅱe在菌体内产量很低，检测也很烦琐，细菌经纯培养达到一定数量后还要破碎或多粘菌素B诱导，需3-4天，因此鉴定毒素虽具有决定性意义，但水肿扬州大学硕士学位论文病的快速诊断是难以利用毒素的鉴定来完成的。而水肿病菌株致病的首要条件是在小肠中定居，因此勃附于病猪小肠薪膜上的细菌都能表达F107的菌毛。根据这一特点，利用抗FIO7菌毛的单抗，一方面小肠勤膜上分离细菌，进行玻板凝集、间接ELISA检测，另一方面直接用小肠勃液做斑点一ELISA，结果表明，斑点一EUSA能快速、敏感、特异性地检测表达F107菌毛的菌株，最小检测量仅为1000个细菌左右，且检测样品勿需纯培养，不怕污染，整个过程仅3一4小时。这一方法的建立，为仔猪水肿病的快速诊断提供了一个非常有效的途径，也为仔猪其它大肠杆菌病的诊断提供了较好的借鉴。