本论文由两部分组成:H5N1亚型血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)DNA疫苗对H5N1亚型禽流感病毒的保护效果研究;以pIRES为载体构建的双表达质粒抗不同亚型流感病毒攻击的交叉保护效果研究。 (一)H5N1高致病性禽流感病毒在1997年第一次突破种属障碍传给人类,至今仍在各大洲广泛存在,影响世界经济秩序并威胁人类生命安全,对此需预先接种疫苗进行有效防范。DNA疫苗是能诱导机体产生持久的体液免疫和细胞免疫应答的一种新型疫苗,HA和NA是流感病毒感染中发挥主要作用的包膜糖蛋白,HA和NA的DNA疫苗对抗流感感染具有良好的保护效果。本文将A/Chicken/Henan/12/2004(H5N1)禽流感病毒的DNA片段HA、NA克隆入pCAGGSP7载体,构建HA和NA DNA疫苗,电击法免疫6～8周龄BALB/c小鼠,免疫两次,间隔三周,加强免疫后一周,用致死剂量H5N1型病毒A/Chicken/Henan/12/2004(H5N1)的小鼠适应株感染小鼠。从小鼠存活率、肺部病毒滴度、抗体应答水平及体重丢失率等方面检测疫苗效果。实验结果表明HA和NA DNA疫苗能有效保护小鼠抵御H5N1亚型禽流感病毒的攻击;为与H5N1亚型HA和NA的DNA疫苗的免疫效果进行比较,本文同样采用H1N1亚型(A/PR/8/34)HA和NA的DNA疫苗,以相同方式免疫小鼠,在致死量同型病毒攻击后,也取得了有效的保护。