藏蒲公英多糖提取工艺及其纳米制剂的免疫试验初步研究

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本论文探讨了藏蒲公英多糖的最佳微波提取工艺。通过用L。(34)正交试验设计方案,考察了提取时间(min)、微波功率(W)、料水比3种因素对藏蒲公英多糖得率的影响,得出最佳提取工艺条件为:料水比1:30,微波功率400W,提取时间20min,在此工艺条件下提取的藏蒲公英多糖平均得率为9.74%,与传统热水提取法所得多糖得率7.46%相比较,多糖得率提高了2.28%,经苯酚-硫酸法测定其纯度为74.3%。采用微波提取藏蒲公英多糖,提取率较高,且能大大的缩短提取时间,操作方便,是较为理想的多糖提取方法。藏蒲公英多糖纳米乳采用本课题组的方法制备,配料比为Tween80:Span80:液体石蜡:乙醇:藏蒲公英多糖水溶液=3:1:2:1:3(v:v),制备的纳米乳为淡黄色透明液体,流动性较好。该纳米乳容易被油溶性染料苏丹红染成红色,并且经高速离心仍保持澄清透明态,无絮凝和分层现象发生,证明制备的藏蒲公英多糖纳米乳是W/0型纳米乳。透射电镜下观察纳米乳液滴大多呈圆球形;纳米粒度仪测得本纳米乳平均粒径为63.4nm,PDI为0.198,粒径分布范围窄;pH值6.48,粘度3.60s,经稳定性验没有出现分层和絮凝现象。通过试验观察正常的健康小鼠分别在服用生理盐水、藏蒲公英多糖水溶液以及藏蒲公英多糖纳米乳的情况下,小鼠的脾脏、胸腺等免疫器官指数、腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数、ANAE阳性淋巴细胞百分率等指标的变化情况。结果显示:藏蒲公英多糖纳米乳能使小鼠免疫器官指数升高,促进免疫器官生长发育,刺激机体体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫,增强小鼠免疫力。该研究结果可作为蒲公英多糖药理作用的补充,也为今后藏蒲公英在西藏养牛业中的进一步应用提供了理论基础。
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