苜蓿为多年生草本豆科苜蓿属植物，是世界上栽培历史悠久、种植面积较大的牧草，它以产量高、营养丰富、适口性好而享有“牧草之王”的美誉。目前，苜蓿叶蛋白(MLP)、苜蓿皂苷(MSS)、苜蓿多糖(MPS)等提取物的研究已成为苜蓿研究的热点。其中，MSS的生理活性及药理作用的研究引起了人们很大的兴趣。皂苷是广泛存在于自然界的一种天然物质，是由糖中羟基或非糖类化合物的羟基以缩醛(苷键)脱水缩合而成的环状缩醛衍生物。苜蓿的根、茎、叶中都含有一定量的皂苷，其化学成分结构复杂，由甾类化合物的寡糖苷及三萜类化合物的寡糖苷所构成。提取MSS一般采用有机溶剂萃取法和大孔吸附树脂法。大孔吸附树脂法是近年来用于天然产物分离的一种新方法，具有工艺简便、条件温和、可反复使用等优点，用于皂苷分离纯化的文献报道逐年增加。本实验采用大孔吸附树脂分离纯化苜蓿水提取液中的皂苷，确定该法从苜蓿中提取MSS的最佳工艺条件。 MSS具有多种药理活性和生物活性。如可抑制胆固醇在肠道中吸收，降低血清胆固醇，防治心脑血管疾病，还可以作为食品的天然甜昧剂、增味剂和抗氧化剂。Malinow报道MSS可有效地治疗实验性高胆固醇血症，并在几种动物实验中都证明具有疗效。丛学滋等人也对MSS的降低血清胆固醇及减轻实验性动脉粥样硬化作用进行了研究，证明MSS对改善心外膜下的较大冠状动脉的内膜阻塞程度有明显作用。而有关MSS减肥作用的研究未见报道，该实验将MSS经口给予实验性肥胖模型大鼠，观察MSS的减肥作用，以期进一步开发苜蓿的新用途。目的：确定大孔吸附树脂分离纯化MSS的工艺参数。 方法：以MSS的吸附量、解吸率为指标，分别对DM-301、HPD700、HPD600、HPD450、HPD300、HPD100、HZ-841、AB-8、D-101型大孔吸附树脂的吸附和解吸性能进行考察。选择吸附、解吸效果最佳树脂作为分离MSS所用大孔树脂。用该树脂吸附MSS，考察吸附时间、上样溶液浓度、溶液pH值、溶液温度对吸附量的影响；使用动态吸附-解吸法考察，以10％乙醇、20％乙醇、30％乙醇、40％乙醇、50％乙醇、60％乙醇和70％乙醇洗脱，测定洗脱液中MSS含量，计算洗脱率，确定洗脱溶媒的浓度和用量。 结果：通过静态吸附法确定了AB-8型大孔吸附树脂能有效分离纯化MSS。具体工艺参数为：通过静态吸附性能的考察，确定MSS最佳吸附上样浓度为0.1％，pH值为2.0，溶液温度为30℃，吸附时间为11小时；通过动态解吸性能的考察，表明60％的乙醇溶液5.0 BV可将MSS完全洗脱。 结论：AB-8型大孔吸附树脂能有效分离纯化富集MSS，60％的乙醇溶液5.0 BV可将MSS完全洗脱。 目的：研究MSS的减肥作用并探讨其可能的作用机制。 方法：将60只雄性SD大鼠随机分为6组(每组10只)：①空白对照组；②肥胖模型对照组；③MSS高剂量组(2.0g/kg)；④MSS中剂量组(1.0 g/kg)；⑤MSS低剂量组(0.5g/kg)；⑥阳性药(曲美)对照组(2.5mg/kg)。空白对照组给予正常饲料，其余各组给予高能营养饲料。同时MSS各组分别灌胃MSS高、中、低剂量；阳性对照组灌胃曲美悬浮液，空白对照组和模型对照组灌胃等容积的蒸馏水，灌胃体积10ml/kg体重。每周称重2次，连续给药70天，末次给药后断食12h，腹腔注射20％乌拉坦麻醉(6ml/kg)，腹主动脉取血并取材。测定肾脏及生殖器周围脂肪重量，测量脂肪细胞最大长径、最大宽径及平均面积，测定肝脏总胆固醇含量，血液学指标观察全血血红蛋白含量(Hgb)、血清白蛋白含量(SAB)、血液葡萄糖含量(BGLu)。 结果 1.MSS对营养肥胖型大鼠体重的影响：MSS中剂量组从给药第16天，高剂量组从给药第30天开始大鼠体重明显减轻，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)，并一直持续到给药70天停药时。MSS对肥胖大鼠体重的增长具有明显的抑制作用。 2.MSS对营养肥胖型大鼠体内脂肪和脂肪细胞的影响：MSS高、中剂量组与肥胖模型组比较，体脂含量明显减少(P＜0.05，P＜0.01)；镜下观察脂肪细胞，MSS高、中剂量组与肥胖模型组相比，视野内脂肪细胞数目明显增多(P＜0.01)，细胞最大长径、最大宽径和平均面积均明显减小(P＜0.01)，MSS低剂量组脂肪细胞最大宽径、平均面积与模型对照组比较也明显减小(P＜0.05)；表明MSS具有较好的减肥效果。 3 MSS对营养肥胖型大鼠肝脏重量和肝脏总胆固醇含量的影响：与模型对照组比较，MSS高、中、低剂量组均能明显降低营养肥胖型大鼠肝脏重量(P＜0.05)、肝脏重量系数(P＜0.05，P＜0.01)和肝脏总胆固醇含量(P＜0.05，P＜0.01)。 4 MSS对营养肥胖型大鼠Hgb、BGLu和SAB的影响：MSS对营养肥胖型大鼠Hgb、BGLu和SAB无明显影响，各组间比较均无显著性差异(P＞0.05)。 结论：MSS可明显减轻营养肥胖型大鼠的体重，显著降低营养肥胖型大鼠体内脂肪含量，对脂肪细胞最大长径、最大宽径和平均面积均有不同程度的影响；MSS能明显降低营养肥胖型大鼠肝脏重量和肝脏总胆固醇含量；MSS具有较好的减肥作用。