过敏性疾病是一类与环境过敏原特异性IgE产生相关的超敏反应疾病。过敏性疾病的病例包括过敏性鼻炎、哮喘、特应性皮炎等。Ⅰ型过敏反应主要是由IgE介导的。IgE分子能够与肥大细胞表面的特异性IgE受体结合，导致肥大细胞介质和前炎症因子的释放。临床上的过敏性反应伴随着嗜曙红细胞和T淋巴细胞控制的迟发相反应。在过敏反应中，T细胞分泌的细胞因子调节IgE合成和促进嗜曙红细胞的分化。过敏原是至少能在部分个体中引起足够强的、可引起IgE相关超敏反应临床表现的IgE反应的抗原。过敏原一般是蛋白质(常是糖蛋白)或能结合到蛋白质上的化合物(半抗原)。人和动物个体对特异过敏原产生特异IgE反应的能力以及反应的强度是遗传决定的。过敏原的基础研究是过敏性疾病防治的基础和原动力，没有好的过敏原就不可能提高过敏性疾病诊断和治疗的特异性。 储藏螨类存在于室内灰尘和潮湿区域中，是引起呼吸道过敏性疾病的重要因素。腐食酪螨是一种重要储藏螨，能够寄生在众多物品如储存商品、腐烂的有机体、植物种子、药材、蘑菇植床等中并且能在适宜条件下大量繁殖。同时，腐食酪螨也经常出现在高脂肪高蛋白的储存食物中，例如亚麻仁、落花生、干酪、火腿、干椰子肉、干香蕉、燕麦片、面粉等。腐食酪螨能够引起过敏性哮喘和过敏性鼻炎等职业过敏性疾病，是一种重要的吸入性过敏原。 本论文以腐食酪螨为研究对象，对其过敏性进行系统深入的研究。主要包括以下几个方面： 一、腐食酪螨过敏原的分析鉴定与纯化 以十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Westere blot)分析和鉴定腐食酪螨蛋白质提取液中的蛋白质组份和过敏原组份，并通过阴离子交换层析和分子排阻色谱进一步纯化。腐食酪螨的蛋白质粗浸液电泳后可以辨认的蛋白带一共有23条，分子量分别为177、118、107、70、67、60、52、45、41、40、38、37、35、27、23、22、18、17、16、15、14、13和12KDa。免疫印迹检测到腐食酪螨的5条致敏蛋白带，分子量分别为128、67～70、36～37、18和16KD，其中分子量为128KDa、67～70KDa、36～37KDa的条带阳性反应率均为100％。而18和16KDa条带的阳性反应率分别为77.8％和44.44％。通过阴离子交换层析和分子排阻色谱从腐食酪螨粗浸液中分离到分子量为18KDa的过敏原组份。腐食酪螨的主要过敏原组份为4种。 二、腐食酪螨原肌球蛋白的克隆、表达及免疫学活性鉴定 提取腐食酪螨总RNA，利用RT-PCR技术克隆腐食酪螨原肌球蛋白的基因，并进行序列分析。将其与：pET-28a载体连接并转化大肠杆菌BL21进行诱导表达，通过Ni<2+>亲和柱对重组蛋白进行纯化，采用免疫印迹检测其IgE结合活性。克隆获得了852bp的腐食酪螨原肌球蛋白基因。该基因为一个编码284氨基酸的开放阅读框。序列分析结果显示该基因与许多无脊椎动物的原肌球蛋白基因有很高的同源性。大肠杆菌表达的重组原肌球蛋白经过Ni<2+>亲和层析柱纯化后经免疫印迹检测具有良好的免疫学活性。成功地克隆和表达了腐食酪螨原肌球蛋白，并证明其能与螨过敏患者血清中的IgE反应。 通过对腐食酪螨的过敏原组份及其原肌球蛋白的研究，为腐食酪螨过敏原的分子生物学研究奠定基础，也为标准化过敏原的研制提供理论依据。