人NDRG2(N-myc downstream regulated gene 2)基因是本研究组用锚定引物PCR方法从正常人脑cDNA文库中克隆得到的一个新基因。基因库登录号为AF159092。NDRG2为NDRG基因家族成员之一，该家族成员有4个：NDRG1，NDRG2，NDRG3，NDRG4，且该基因家族成员的氨基酸组成在从低等生物到高等生物的进化中有相当高的保守性，以上提示该基因家族在细胞的生命过程起着重要作用。而目前对于NDRG2结构和功能的研究尚处于初步阶段。我室前期研究发现，将该基因转染入某些肿瘤细胞系后具有抑制细胞增殖的功能，且发现该基因在肺癌和肝癌中的表达低于相应的癌旁组织，但具体机制尚不清楚。 为了分析Ndrg2在某些肿瘤组织中的表达低于癌旁组织的原因，我们分别从细胞水平和组织水平进行了检测。我们首先收集并培养第四军医大学硕卜学位论文了6种肿瘤细胞系，其中以胃的永生化细胞GES为阳性对照细胞，应用半定量盯一PCR，RNA斑点杂交，Western blot和免疫组织化学的方法，筛选到了NdrgZ表达水平明显低于阳性对照GES细胞的细胞系:乳腺癌细胞系MC厂一7，MDA一MB一231，SK一B尺一3，胃癌细胞系SGC一7901，BGC一823，MGC一803，肺癌细胞系A549，肝癌细胞系HepGZ，胶质瘤细胞系BT一325。然后，以这些闪drgZ表达降低的细胞系为研究材料，对其NdrgZ表达降低的原因进行逐一分析。我们分别运用双重基因组pCR、PCR一SSCp、甲基化敏感性内切酶一PCR的方法，检测在这些NdrgZ表达降低的肿瘤细胞系中是否存在北W乙2杂合性缺失、核心启动子的点突变及启动子区的甲基化等。双重基因组PCR结果显示，乳腺癌细胞系MCF一7存在切斤甜杂合性缺失，而在其它肿瘤细胞系中未检测到;尸CR一SSCP结果发现，肝癌细胞系HepGZ中存在八汉代召核心启动子区的突变;甲基化敏感性内切酶一尸CR分析结果显示，在乳腺癌细胞系SKBR一3，胃癌细胞系BGC一823，肝癌细胞系HepGZ中一憾撇留启动子区存在甲基化。而在肺癌细胞系A549，乳腺癌细胞系MOAMB一231，神经胶质瘤细胞系BT一325中不存在八奴欣沼核心启动子区的点突变及上游启动子区的甲基化。 以21例乳腺肿瘤组织及癌旁组织为材料，应用半定量RT一PCR及western blot的方法检测了21例乳腺肿瘤组织及癌旁组织中NdrgZ的表达情况，结果筛选出了5例NdrgZ表达明显低于相应癌旁组织的乳腺肿瘤组织。然后，应用双重基因组pCR及PCR一SSC尸的方法检测NdrgZ表达降低的乳腺肿瘤组织中是否存在八双代沼的杂合性缺失及核心启动子区的突变。结果发现，在这5例NdrgZ表达明显低于相应癌旁组织的乳腺肿瘤组织中，不存在八汉砚召的杂合性缺失及核心启动子区的点突变。 通过以上研究，我们得出初步结论:入drgZ在多种肿瘤细胞系中的表达明显低于阳性对照GES细胞，分析NdrgZ表达降低的原因，发现在某些肿瘤细胞系中存在J峪啾留的杂合性缺失，而在某些肿瘤第四军医大学硕!学位论文细胞中存在八汉欣沼核心启动子区的突变，并且发现八劲代召启动子区的甲基化也是其失活的原因之一。这些结果提示，NdrgZ的表达降低可能参与了这些肿瘤细胞的发生或发展，而八公斤吞2作为一种抑癌候选基因，其失活的方式有多种，而且在不同的肿瘤细胞系中失活的方式可能不同，在同一种肿瘤细胞系中，八汉代沼可能存在不同的失活方式。 在对21例乳腺肿瘤组织及癌旁组织的分析结果发现:NdrgZ在某些乳腺肿瘤组织中的表达量明显低于相应的癌旁组织，通过进一步分析NdrgZ表达降低的原因，并未发现八叹代沼的杂合性缺失及启动子区的点突变。以上结果提示NdrgZ的表达降低可能参与乳腺癌的发生，发展或转移，而议W乙夕的杂合性缺失及启动子区的突变可能不是NdrgZ在乳腺肿瘤组织中表达低于相应癌旁组织的主要原因，推测可能存在其它原因。