冠心病猝死者冠状动脉粥样硬化斑块C-反应蛋白表达的研究

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[目的]冠心病猝死(sudden coronary death, SCD)的病理诊断一直是法医病理学的重要研究课题之一,多年来,国内外研究人员对此进行了大量探讨。SCD发生的病理基础是冠状动脉(以下简称冠脉)粥样硬化,但是由于SCD发生迅速、多发生在院外,且肉眼观察和常规组织学切片H.E.染色镜检很难发现明显的病理形态学改变,所以一直到现在,法医学检案仍然延续常规的排他性诊断,而未找到SCD诊断的“金标准”。传统研究的注意力多集中在早期心肌缺血和心肌缺血再灌注损伤等方面。上世纪70年代研究者发现了血清炎症反应标志物C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白介素(interleukin, IL)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)等一批炎症相关因子后,一些学者对于冠心病(coronary heart disease, CHD)发生的传统定义——脂质沉积过程才有所置疑。1999年Ross第一次明确提出“动脉粥样硬化是一种炎性疾病”的假说,认为动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)不仅仅是脂质沉积过程,而是由炎症贯穿了AS发生发展的全过程。之后大量研究围绕炎症与AS的关系展开,有学者研究发现CRP水平的升高和急性冠脉综合征的发生密切相关。但SCD者冠脉粥样硬化斑块内的CRP表达情况尚未见报道。为此,我们应用免疫组化和图像分析技术来定性和半定量检测CRP在SCD者冠脉粥样硬化斑块内表达的变化,以探讨其作为死后SCD诊断指标的意义。[方法]从本教研室2001~2004年法医病理学尸检档案中挑选从死亡时间至尸检时间在48小时以内的案例共68例,并搜集其原始档案资料及其心脏标本、蜡块和H.E.切片。分为A组(SCD组,实验组)、B组(CHD非心脏性疾病死亡组,对照组Ⅰ)和C组(无明显冠脉粥样硬化组,对照组Ⅱ)三组。选择病例的标准是:三组均排除细菌感染、病毒感染、急慢性炎症、肿瘤及免疫性疾病。A组和B组每例冠脉的左前降支(left anterior descending, LAD)和右主支(right main, RM)内膜AS斑块病变达3级或3级以上,而不考虑另外两个分支左主干(left main, LM)和左旋支(left circumflex, LC)有无病变及其等级;C组冠脉四个分支均无明显粥样硬化病变或仅有1级的轻度病变。A组排除暴力死及其它疾病所致的死亡,明确诊断为SCD,其猝死时间按WHO标准,从症状发作到死亡时间在24小时内;B组、C组的死亡原因是暴力死或非心脏性疾病(如脑出血、中毒、机械性窒息、机械性损伤等)所致。运用免疫组化染色技术SABC法和图像分析技术,对三组冠脉粥样硬化斑块内CRP表达情况进行定性、半定量检测和统计学分析。[结果] A组27例,其中,男20例,女7例;年龄30~74岁,平均50.30岁;从死亡到尸检时间为48h以内;冠脉粥样硬化斑块病变4级22例,3级5例;心重220g~510g,平均388.22g。B组21例,其中,男18例,女3例;年龄35~81岁,平均52.19岁;冠脉粥样硬化斑块病变4级8例,3级13例;心重220g~495g,平均379.29g;死因为外伤性脑出血8例,中毒4例,机械性窒息1例,机械性损伤1例,病理性脑出血3例,主动脉夹层破裂1例,脑水肿、脑疝形成1例,肺脂肪栓塞1例,脑梗死1例。C组20例,其中,男12例,女8例,年龄17~42岁,平均28.70岁;心重210g~350g,平均293.50g,冠脉内膜未见增厚者2例,轻度增厚1级者18例;死因为脑外伤5例,中毒4例,电击1例,机械性损伤3例,机械性窒息1例,肺脂肪栓塞1例,肺羊水栓塞4例,癫痫发作1例。免疫组织化学染色:A组27例中,21例强阳性表达,6例出现较强阳性表达; B组21例中,3例较弱阳性表达,11例出现微弱阳性表达,7例未见阳性表达;C组冠脉内膜及轻度增厚处未见CRP阳性反应。经图像分析检测并进行统计分析结果表明,SCD组与对照组Ⅰ冠脉粥样硬化斑块中CRP表达的OD值和R值的差异有显著性意义(P <0.01),与对照组Ⅱ相比,其冠脉粥样硬化斑块中CRP表达的OD值和R值的差异也有显著性意义(P <0.01);而两对照组间冠脉粥样硬化斑块中CRP表达的差异无显著性意义。[结论] SCD组冠脉粥样硬化斑块中CRP表达呈阳性,其表达的OD值和R值与两个对照组相比的差异有显著性意义;认为这种差异可能与SCD的发生有一定的关系;其冠脉粥样硬化斑块中CRP的表达情况,可作为SCD者死后法医病理学诊断的一个有用指标。
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