益生性乳酸菌的分离筛选及对脂多糖诱导的急性肝损伤保护作用的研究

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:calvin
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乳酸菌因其多种优越的性能而被研究者关注。本研究首先从奶制品中分离乳酸菌,并根据乳酸菌的菌落形态特征、过氧化氢酶接触试验以及革兰氏染色试验对乳酸菌进行初步鉴定。再利用16S rDNA序列分析、生理生化特性以及碳水化合物发酵试验进行进一步鉴定。然后通过人工胃液耐受力、胆盐耐受力以及粘附能力试验进行益生性乳酸菌的初步筛选。最后用筛选的6株乳酸杆菌灌胃小鼠,LPS/D-GalN诱导小鼠急性肝损伤,通过观察小鼠的体重、肝脏的病理变化及重量,检测小鼠外周血以及肝脏中AST与ALT的分泌量,肝脏与小肠中TNF-α与IL-6的表达量,研究这6株乳酸杆菌对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤的保护效果。结果显示:1.从奶制品中共分离出107株乳酸菌,属于17个种。其中乳酸杆菌71株属于9个种,乳酸球菌36株属于8个种:Lactobacillusbrevis、Lactobacillus paracasei subsp.paracasei、Lactobacillus gallinarum、Lactobacillus fermentum、Lactobacillus reuteri、Lactobacillus helveticus、Lactobacillus plantarum subsp.argentoratensis、Lactobacillusdelbrue、、Lactobacillus diolivorans、Pediococcus pentosaceus、Enterococcus faecalis、Leuconostoc mesenteroides、Pediococcus acidilactici、Pediococcus.sp、Enterococcus.p、Lactococcus.sp、Leuconostoc.sp。这17种乳酸菌中有88.3%为同型发酵乳酸菌,11.7%为异型发酵乳酸菌,部分菌株可以在低pH、高盐、低温、高温的条件下生长。3.对139株乳酸菌进行耐人工胃液(pH=3.0)、耐胆盐以及粘附Caco-2细胞的试验,共筛选出6株具有较强耐受和粘附能力的的乳酸杆菌,它们分别是:L.paracasei subsp.paracasei WXD5、L.casei SXJ30、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD55、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD100、L.subsp.argentoratenis WXD106、L.plantarum subsp.argentoratenis WXD101。4.研究 WXD5、WXD55、WXD100、WXD101、WXD106、SXJ30 这 6 株乳酸菌对LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤保护作用。结果显示,与模型组相比,灌胃乳酸菌 WXD5、WXD55、WXD100、WXD101、WXD106、SXJ30 的小鼠肝脏病变程度得到不同程度的缓解,AST、ALT、IL-6以及TNF-α因子的表达量也显著下降,且以灌胃乳酸菌WXD5保护效果最为明显,可以为急性肝损伤的研究提供技术支持与理论依据。
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