草莓(Fragaria×ananassa Duch.)属蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上广泛栽培的重要经济果树。随着人们生活水平的不断提高，消费者对草莓果实品质的要求逐渐提高。现代基因工程直接在基因水平上进行改良，打破了物种间的界限，在培育抗病、抗虫、抗逆境和抗除草剂等草莓优良品种中发挥越来越重要的作用。自开展草莓转基因研究以来，在草莓导入了多种有经济价值的外源目的基因。植物甜蛋白Brazzein已经在多种高等植物中实现转化，但是表达效果不尽相同，本实验的目的就是在前人研究的基础上，根据甜味蛋白Brazzein基因序列及其表达特性，通过重叠延伸PCR方法克隆了该基因全长并构建植物双元表达载体，采用农杆菌介导法转入草莓中，获得转基因植株。主要研究结果如下:　　 1.根据Brazzein基因的53氨基酸序列和双子叶植物对遗传密码子的偏爱性设计引物，利用重叠PCR法合成了Brazzein基因全长并在Brazzein全长基因的5端添加黄花梨防御素基因PpyDFN1信号肽，（GenBank登录号为HM044853），对该基因进行了修饰，同时构建了植物双元表达载体PYH4215-Bra。该载体含有GUS报告基因和潮霉素Hyg抗性的潮霉素磷酸转移酶基因（htp），T-DNA区三个外源基因均由CaMV35S启动子控制。该载体导入农杆菌菌株EHA105用于‘章姬’草莓遗传转化。　　 2.以‘章姬’草莓试管苗叶片为外植体，采用农杆菌介导法对草莓的遗传转化体系进行了研究。研究了菌液浓度、菌液侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓度、预培养时间、潮霉素浓度、羧苄青霉素等因素对草莓遗传转化的影响，建立了高效的遗传转化体系。结果显示，菌液浓度OD600=0.4-0.5，根据菌液浓度的大小适当调节侵染时间，侵染时间6-8 min较适宜。共培养时间3d后直接转入筛选培养基中，筛选暗14d后转移到光下培养效果较好，适宜的潮霉素浓度为4 mg/L，羧苄青霉素浓度为200mg/L。活化农杆菌菌体时不需添加乙酰丁香酮。　　 3.利用GUS组织化学染色对124株抗性芽进行了检测，有58株抗性芽表现为GUS阳性，阳性率为46.8％;利用PCR和RT-PCR法对‘章姬’草莓的13株GUS阳性株进行了检测，获得了8株草莓转基因植株，编号分别为Bra-1-Bra-8。　　 4.以4个‘章姬’草莓转基因株系为实验材料，对果实品比、可溶性固性物含量和可溶性糖含量的测定结果表明:4个转基因株系中，Bra-3株系果实明显比其他株系果实甜度高，可溶性固形物含量达到21.33，显著高于其他转基因株系和对照株系，转基因株系与非转化株系果实的可溶性糖含量没有显著差异。