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目的观察维生素D对小鼠严重烫伤后炎症反应的影响,为临床应用维生素D减轻烧伤后炎症反应提供依据。方法1.建立小鼠维生素D缺乏模型3周龄健康清洁级KM小鼠40只,雌雄各20只,置于避免紫外线的黄光环境下,雌雄分笼饲养,给予缺乏维生素D饲料(含钙2%、磷1.25%)。8周后尾静脉取血,酶联免疫法检测血清25(OH)D3。选取血清25(OH)D3测得值<2.5ng/ml的小鼠形成繁殖对12对,雌雄各1只合笼饲养。待产下小鼠后用第2代小鼠制作烫伤模型,未满6周龄前置于同样的黄光无紫外线环境中,3周龄断乳,给予缺乏维生素D饲料饲养,满6周龄时制作深II度烫伤模型。2.建立维生素D缺乏小鼠烫伤模型取2代6周龄KM小鼠80只,给每只小鼠腹腔内注射10%水合氯醛(40mg/kg)麻醉,麻醉后背部用4%硫化钠脱毛。第2天在清醒状态下,将背部脱毛区置于98℃水中13秒；‘造成背部20%TBSA (2.5cm×2.5cm)深II度烫伤(经病理切片证实)。烫伤后立即经腹腔注射补充乳酸林格氏液0.6m1抗休克。创面涂20%磺胺嘧啶银霜抗感染2次／天。单笼喂养,自由进食。3.实验动物的分组取烫伤小鼠80只,随机分为治疗组40只和对照组40只。另取同一饲养机构6周龄KM小鼠16只作为空白组。治疗组小鼠烫伤后即刻腹腔注射维生素D2200IU/Kg体重,并且每24小时注射同样剂量1次。对照组小鼠烫伤后不予注射维生素D,空白组小鼠不烫伤。4.观察指标1)血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-4和IL-10治疗组和对照组小鼠于烫伤后6h、2h、4h、48h和96h 5个时间点随机各取8只,断头处死后取血,酶联免疫法检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-4和IL-10浓度。随机选取8只空白组小鼠,于断头取血后检测血中上述炎性因子含量。2)内脏组织淋巴结细菌培养和小肠粘膜组织病理观察治疗组和对照组小鼠伤后48h断头取血后,无菌分离肝、脾、肠系膜淋巴结制成匀浆,稀释后接种于LB琼脂培养基,置37℃的CO2孵箱做需氧细菌培养；48 h后计数菌落数,计算每克组织内细菌菌落形成单位(CEU)及其标准差；并取小鼠空肠制作常规石蜡切片,经过HE染色,在光学显微镜下比较两组小鼠肠粘膜组织的病理变化。剩余8只空白组小鼠同样制备内脏淋巴结匀浆培养细菌并制作空肠石蜡切片。5.统计方法采用SPSS11.7统计软件进行数据分析,所有计量资料均以均数±标准差(x±s)表示。对治疗组和对照组炎性因子进行组内和组间的单因素方差(one-way ANOVA)及SNK法(Student-Newman-Keuls)分析；空白组与治疗组和对照组炎性因子及内脏淋巴结细菌培养结果均数间差别进行组间独立样本t检验(two independent sample t-test)结果1.小鼠精神饮食情况治疗组、对照组与空白组相比小鼠精神萎靡,食欲差,反应迟钝,活动减少。治疗组与对照组小鼠精神及饮食情况无明显差异。2.血清致炎性介质TNF-α、IL-1β含量测定1)治疗组和对照组小鼠血清TNF-α和IL-1β浓度伤后各时间点均比空白组高(P<0.01)；2)治疗组小鼠血清TNF-α和IL-1β浓度在伤后24h、48h、96h均比对照组低(P<0.01)3)治疗组和对照组小鼠血清TNF-α和IL-1β浓度均于伤后24h达到峰值,其峰值均数分别为3.53±0.63ng/ml,0.48±0.12ng/ml和5.42+0.45 ng/m1,0.33+0.07 ng/ml。3.血清抗炎介质IL-4、1L-10含量测定1)治疗组和对照组小鼠血清IL-4浓度在伤后24h、48h、96h均明显高于空白组(P<0.01),血清IL-10浓度在伤后12h、24h、48h、96h均明显高于空白组(P<0.01)；2)治疗组小鼠血清IL-4浓度在伤后24h、48h、96h均明显高于对照组(P<0.01),血清IL-10浓度在伤后12h、24h、48h、96h均明显高于对照组(P<0.01)；3)治疗组和对照组小鼠血清IL-4、IL-10浓度均随伤后时间延长而升高。4.肠道细菌移位情况除空白组外,对照组和治疗组内脏组织细菌培养均有菌落形成。治疗组细菌移位量均数(肠系膜淋巴结780±28.7、肝脏147±15.3、脾脏254±18.7)明显低于对照组(肠系膜淋巴结850±32.8、肝脏180±17.5、脾脏295±28.2)(P<0.01)。5.各组小肠病理变化结果治疗组可见小肠腺轻度扩大,绒毛被覆上皮完整,排列整齐；烫伤组小鼠小肠粘膜水肿明显,小肠腺腔扩大,绒毛上皮肿胀,部分上皮松散、脱落,肠粘膜下炎性细胞浸润,空白组未见异常。结论1.伤后治疗组和对照组小鼠血清TNF-α、IL-1β浓度均数与空白组比较均明显升高,但治疗组血清TNF-α、IL-1β浓度均数在伤后24h、48h、96h均明显低于对照组,说明维生素D对小鼠烫伤后致炎性因子的生成有抑制作用。2.治疗组和对照组小鼠血清IL-4浓度均数与空白组比较均在伤后24h开始明显升高,但同一时间点比较治疗组均高于对照组；治疗组和对照组小鼠血清IL-10浓度均数与空白组比较分别在伤后12h和24h开始明显升高,同一时间点比较治疗组均高于对照组,说明维生素D对小鼠烫伤后抗炎因子的生成有促进作用。3.治疗组细菌移位量均数明显低于对照组；治疗组小肠水肿性改变较对照组程度轻,说明维生素D能够防止烫伤后肠道细菌移位,减轻小肠粘膜水肿,对小肠膜粘膜具有保护作用。