海洋半乳寡糖芯片制备及寡糖与凝集素相互作用研究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:abcdefghijklmn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文以红藻来源的半乳聚糖,κ-,τ-,λ-卡拉胶、琼胶、硫琼胶以及化学处理得到的脱硫κ-,λ-卡拉胶为原料,采用弱酸降解制备各种寡糖混合物,通过低压凝胶渗透色谱(Low pressure gel permeation chromatography, LPGPC)技术获得各系列寡糖单体37个,其中9个为首次获得。通过电喷雾离子化质谱(Electrospray ionization mass chromatography, ESI-MS)方法对所得寡糖结构和序列进行了确证。以制备的半乳寡糖为原料,通过还原胺化法将其与具有氨基的磷脂(DHPE)偶联,制备了40个拟半乳寡糖脂,其中14个为首次获得。以制备的拟糖脂为原料,考察了四种构建糖芯片的方法,即薄层点样仪制备微型糖芯片、手动点样仪制备微型糖芯片、薄层点样仪制备min-糖芯片和全自动芯片点样仪制备高密度糖芯片的优缺点。结果表明,mini-糖芯片适合于海洋糖芯片的构建,而微型芯片适用于糖与蛋白结合实验的条件摸索。利用mini-糖芯片技术和ELISA实验方法对各半乳寡糖与RCA120结合,首次研究发现RCA120特异性识别非还原端为Galβ1,4anGal结构的寡糖,进一步研究还发现:(1)非还原端Gal的C-2或C-6位被硫酸基取代后,可增强其与RCA120的亲和力;(2)非还原端Gal的C-4位被硫酸基取代后,会失去与RCA120的亲和力,除去C-4位硫酸基后亲和力将显著升高;(3)非还原端Gal的C-3位被α-Gal取代后,对RCA120亲和力无影响,但被α-L-anGal取代后,将完全失去与RCA120结合能力。各半乳寡糖与RCA120的亲和力顺序为:Gal6Sβ1,4anGal(L)-R > Gal2Sβ1,4Gal2S6S-R > Galβ1,4anGal(L)-R > Galβ1,4GlcNAc-R > Galβ1,4anGal(D)-R > Galβ1,4Gal-R≈Galα1,3Galβ1,4Gal-R > Gal4Sβ1,4anGal(D)-R≈Galβ1,3GlcNAc-R≈Neu5Acα2,6Galβ1,4GlcNAc-R≈anGal(L)α1,3Gal6Sβ1,4anGal(L)-R (R代表单糖或寡糖)。ECL特异性识别含有乳糖胺(Galβ1,4GlcNAc-R)结构单元,非还原端Gal羟基被任何其它基团取代后,都影响其亲和力,但非还原端为Galβ1,4anGal(L or D)结构的寡糖与ECL有微弱的结合力。此外,利用构建的mini-糖芯片技术还研究了30种半乳寡糖与Galectin-3的亲和力差异。结果表明:Galectin-3除了识别常规Galβ1,4GlcNAc结构外,与琼胶七糖以上寡糖(Galβ1,4anGal(L)-R)以及三至五糖的硫琼胶寡糖(Gal6Sβ1,4anGal(L)-R)有较强的亲和力。该结果为硫琼胶寡糖作为Galectin-3抑制剂,用于新型抗肿瘤药物的开发提供了基础。
其他文献
目的:探讨酮替芬联合沙丁胺醇治疗小儿咳嗽变异性哮喘急性期的治疗效果。方法选取咳嗽变异性哮喘急性期患儿100例,随机分为观察组和对照组,各50例,观察组患儿采用酮替芬联合
在借鉴国内外英语教学中戏剧技巧使用的基础上,介绍了在英语课堂中如何使用读者剧场的教学形式,就具体的读者剧场形式的英语教学步骤和教学计划给出了具体例子。
深入推进义务教育优质均衡发展,努力实现所有适龄儿童少年“上好学”,对于坚持以人为本、促进人的全面发展,解决义务教育深层次矛盾、推动教育事业科学发展,促进教育公平、构
为了布控打击涉案车辆、“假套牌”车、机动车“违法大户”和“失格”驾驶人等重点车辆和人员,弥补市内道路卡口缉查布控系统一体化发展的空白,通过整合现有“电子警察”系统
目的输卵管阻塞性不孕症的治疗体会。方法选择2010年2月~2014年1月我院妇科门诊收治的60例输卵管阻塞性不孕症的病历资料,采用中西药结合疗法治疗输卵管阻塞性不孕症。结果本
目的观察健胃愈脑汤对脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响。方法选取30只成年雄性SD大鼠为研究对象,随机分为对照组、假手术组和健胃愈脑汤组各10只,将假手术组和健胃愈脑汤组大
目的:探讨普伐他汀对血脂正常原发性高血压患者血压及血浆炎性细胞因子的影响。方法选取我院收治的100例血脂正常原发性高血压患者作为研究对象,随机分为研究组和对照组(每组