胎儿生长受限(fetal growth retriction, FGR)指在不利因素下胎儿未达到其潜在遗传增长能力,全世界发病达到10%。约40%患者致病因素不详,被称为特发性胎儿生长受限(Idiopathic Fetal Growth Restriction, IFGR)。其围产期死亡率是正常新生儿的4-10倍,并且约有5%-10%妊娠合并FGR的结局会造成死产或新生儿死亡。FGR患儿远期并发症多见如神经系统发育不良和生长迟缓,而且有文献证明这类新生儿远期更容易罹患心血管系统疾病和糖尿病。因此,了解IFGR基础发病机制,找到其潜在的治疗措施,具有重要的意义。IFGR的病因复杂并且可能由多因素造成,尽管对胎儿生长造成负面影响的原因很多,但是其具体的作用机制我们知道的少之甚少,在这些影响因素中包括母体因素,如营养不良、慢性高血压和子痫前期。另外,胎盘形成缺陷和胎儿因素,如染色体异常和先天异常都会影响胎儿的出生体重。胎盘形成缺陷导致的IFGR是因为胎盘功能不足,从而影响了胎儿从母血中获得营养和导致代谢废物运输障碍。胎盘功能缺陷也体现在一方面,即子宫循环灌注的减少。另外子宫动脉阻力增加也是IFGR发病的常见原因,因为高阻力可以降低子宫胎盘灌注。因此胎盘功能不足会直接影响胎儿在子宫内的生长。syncytin是人内源性逆转录缺陷病毒基因(HERV)系列中HERV-W编码的糖包膜蛋白,功能主要为促进细胞膜融合,介导细胞滋养细胞(cytotrophoblast,CT)向合体滋养细胞(syncytiotrophoblast,ST)融合生长,对维持正常胎盘的形成和功能有着重要的作用。GCM蛋白(glial cells missing)是一种具有保守DNA结合区域的转录因子。在胎盘发育过程中,滋养细胞的分化和融合是需要多种转录因子介导的,GCMa是其中必需的转录因子,它能够调控多种相关基因的表达参与合体滋养层细胞的分化和融合。GCMa基因的表达可通过cAMP途径而活化,同时作为转录因子的GCMa能够识别HERV-W家族syncytin基因5’-LTR上游区域的两个GCMa结合位点(GBSs),从而激活syncytin基因的表达并增强syncytin调控滋养细胞融合的作用。胎盘生长因子(Placenta growth factor,PLGF)属于血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)家族成员之一,由于它是通过cDNA文库在胎盘组织中克隆出来,所以称之为胎盘生长因子,因此这暗示他在滋养细胞侵入母体子宫蜕膜的过程中起着重要的作用。另外,有学者认为GCMa的低表达可以降低PLGF启动子的活化,使PLGF基因表达下调,最终导致胎盘不良血管的形成。目的采用免疫组化S-P法、RT-PCR方法检测在正常胎盘组织(对照组)和患有IFGR孕妇胎盘组织(实验组)中GCMa、syncytin的表达,探讨两者在IFGR疾病中所起的作用,为IFGR病因的深入研究提供线索,也为今后采取相应的干预措施提供理论依据。材料与方法1研究对象选取郑州大学第三附属医院2010年12月至2012年03月住院分娩的病人,其中40例诊断为IFGR并行剖宫产分娩的孕妇为实验组,40例正常足月剖宫产分娩的孕妇为对照组。2组孕妇的年龄、孕前体质量、孕周、孕次均无统计学意义(P>0.05),新生儿体质量有统计学意义(P<0.05)。 IFGR的诊断标准参照《妇产科学》第七版(人民卫生出版社)。2研究方法2.1胎盘组织标本采集：自然娩出胎盘10min内,避开胎盘钙化灶、梗死灶在无菌操作下于母体面中央取两块1cm×1cm×1cm大小的组织块,放入弯盘后立即用无菌生理盐水冲洗去处血液,一块放入装有甲醛的无菌瓶中固定,之后做常规石蜡包埋,5μ m厚度连续切片保存备用,另一块-80℃保存备用。2.2检测方法：采用免疫组织化学S-P法、逆转录-聚合酶链反应(FRT-PCR)检测两组孕妇胎盘组织中GCMa、syncytin蛋白和mRNA的表达。3统计学方法采用SPSS17.0软件包进行数据统计分析,以均数±标准差(x±s)表示,对数据进行正态性和方差齐性检验,采用两独立样本t检验、t检验或秩和检验,相关性采用Pearson直线相关分析。检验水准a=0.05。结果1研究对象一般资料的分析两组孕妇的年龄、孕前体质量、孕周、孕次均无统计学意义(P>0.05)；实验组新生儿出生体质量(2198.10±149.59)g低于对照组新生儿体质量(3675.88±270.61)g,差异有统计学意义(P<0.05)。2对照组和实验组胎盘组织GCMa、syncytin蛋白的表达及相关性两组胎盘合体滋养细胞,GCMa、syncytin蛋白在细胞膜和细胞质中均有黄染颗粒状阳性表达,以阳性区平均积分光密度值为检测指标。GCMa蛋白的表达,实验组(120.81±4.42)低于对照组(160.45+7.83), syncytin蛋白的表达,实验组(110.73±7.95)低于对照组(148.49±5.20)；两者差异均具有统计学意义(P<0.05)。实验组中GCMa、syncytin蛋白的表达呈正相关(r=0.480,P=0.002)。3对照组和实验组胎盘组织GCMa、 syncytin mRNA的表达及相关性syncytin和GCMa的mRNA表达量分别以syncytin或GCMa扩增DNA条带的灰度值/GAPDH灰度值计算。GCMa mRNA的表达,实验组(0.11±0.01)低于对照组(0.43±0.02),syncytin mRNA的表达,实验组(0.13±0.01)低于对照组(0.55±0.02)；两者差异均具有统计学意义(P<0.05)。实验组中GCMa、 syncytin mRNA的表达呈正相关(r=0.410,P=0.009)。结论1. GCMa、 syncytin蛋白在两组胎盘组织中均有表达,且均在IFGR患者胎盘组织中低表达,可能各自通过单独作用或两者协同效应导致IFGR的发生。2. GCMa和syncytin mRNA在IFGR患者胎盘组织中表达降低,说明其可能在转录水平发生功能缺陷单独或共同导致IFGR的发生。