冬虫夏草原生质体分离与再生条件的研究

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该文着重探讨冬虫夏草(Cordyceps sinensis)菌丝的原生质体分离与再生条件.结果表明,用SD培养基培养菌丝7天、以0.6M MgSO<,4>为渗透压稳定剂、采用2.0%纤维素酶、酶液pH值6.0、温度27℃酶解3.5hr条件下,原生质体产量可达1.5×10<7>个/ml以上.原生质体形成方式有顶端释放和原位释放两种.原生质体在0.6M甘露醇为渗透压稳定剂、pH值6.0的RM<,1>培养基上再生为佳,再生率达2.67%,再生方式有4种,以直接发芽为主.另外,冬虫夏草和蛹虫草的杀菌剂PIC试验表明,由于它们之间存在着遗传差异,导致各自的杀菌剂PIC范围的不同.通过U.V.照射冬虫夏草菌丝体,在含杀菌剂培养基上筛选出一抗药突变菌株,经斜面PDA4次转代培养以及原生质体分离和再生试验表明,该菌株的抗性遗传稳定,为原生质体的融合研究提供了遗传标记材料.
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