长根菇和正红菇多糖的分离纯化、结构及生物活性研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:lmwtz0x8u0
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很多食用菌不仅味道鲜美、营养丰富,而且具有很高的药用价值,尤其是食用菌多糖具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、降血糖、降血脂和保肝等诸多功能,因此在医药和功能性食品领域有着广泛的应用前景。本研究分别从长根菇和正红菇的子实体中分离纯化得到四种均一组分多糖,即长根菇水提多糖ORWP、碱提多糖ORAP以及正红菇水提多糖RVLWP、碱提多糖RVLAP,并对其结构和生物活性进行了研究。ORWP 的 Mw 为 12.1 kDa,Mn 为 9.03 kDa,D 值(Mw/Mn)为 1.34;ORAP 的 Mw 为 11.5 kDa,Mn为8.94kDa,D值为1.29。两者均主要是由核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,但是各单糖的摩尔比有较大的差异,分别为0.15:0.32:1.02:2.45:15.74:65.85:14.47和0.16:0.51:1.02:3.31:18.41:72.35:4.24。红外光谱分析表明,ORWP和ORAP均为含有β构型糖苷键的吡喃糖。ORWP和ORAP具有良好的体外DPPH自由基、H202清除作用和抑制亚油酸过氧化作用,以及一定的还原能力和螯合亚铁离子的能力。体内保护肝脏实验表明ORWP和ORAP可显著降低CC14处理小鼠血清中转氨酶(AST、ALT)的活性以及肝脏中脂质过氧化产物MDA的含量,同时提高肝脏抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性来增强机体清除自由基和抑制脂质过氧化反应的能力,从而维持肝细胞膜的稳定性,所以推断长根菇多糖的护肝作用可能与其自身良好的抗氧化性能以及可以增强肝细胞内抗氧化酶的活性有关。ORWP和ORAP在体外基本不抑制S180肿瘤细胞的增殖,但在体内明显抑制S180肿瘤的生长。并且ORWP和ORAP可显著提高荷瘤小鼠免疫器官指数,促进IL-2和IFN-y的产生,降低免疫抑制因子IL-10的产生,表明长根菇多糖可能是通过提高生物体自身的免疫力而非直接的细胞毒性作用来实现抗肿瘤作用的。经HP-GPC、GC-MS、红外光谱检测,RVLWP为含有β构型糖苷键的吡喃糖;Mw为12.9 kDa,Mn为9.20kDa,D值为1.40;单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖(摩尔比为 0.28:0.91:1.71:12.50:67.77:16.80)。RVLAP 为含有 α 构型糖苷键的吡喃糖;Mw 为 4.00kDa,Mn为3.27 kDa,D值为1.22;单糖组成为核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖(摩尔比为 0.30:0.79:2.70:4.54:29.07:57.79:4.81)。RVLWP 和 RVLAP 均具有良好的 DPPH 自由基、H202清除作用、抑制亚油酸过氧化以及螯合亚铁离子的能力,并且具有一定的还原能力,同样浓度下,RVLWP比RVLAP具有更强的抗氧化作用。RVLWP和RVLAP具有较好的保护肝脏作用,各剂量组小鼠血清中AST及ALT活性较阴性对照组显著降低,同时肝脏中的抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性显著升高,MDA含量显著降低。体外实验表明正红菇多糖对S180肿瘤细胞的增殖基本没有抑制作用,但是体内实验表明RVLWP和RVLAP均可明显抑制小鼠体内S180肿瘤的生长并可协同增强环磷酰胺的抑瘤作用。RVLWP和RVLAP可显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数,促进Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的产生,抑制Th2型细胞因子IL-10的产生,并且RVLWP和RVLAP可以在一定程度上缓解环磷酰胺对荷瘤小鼠免疫系统的伤害。
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