本课题来源于江苏省教育厅产业化项目JHZD09-11"大青叶、淡竹叶的GAP研究”,江苏省高等学校“中药资源化学研究”优秀科技创新团队(2011)项目。淡竹叶为禾本科植物淡竹叶Lophatherum gracile Brongn.的干燥茎叶,具有清热泻火,除烦止渴,利尿通淋等功效,常用于热病烦渴,小便赤涩淋痛,口舌生疮等。淡竹叶为卫生部公布的药食两用中药之一,既有食物所必需的营养成分,又有中药所必需的活性成分和中药的偏性,安全可靠,药效明显,且资源丰富。但淡竹叶的品质评价方法还比较单一,有效成分不是十分明确,药理作用研究不够深入。本论文开展了如下的研究工作：1、对淡竹叶全国主要产区进行了资源调查,并对资源现状进行了分析总结。经调查研究发现,江西赣州、湖南郴州和贵州铜仁地区为现行市场上商品淡竹叶的主要来源产区,其余产地多为自产自销。本次调查对主产区淡竹叶的年产量、采收加工、贮藏、商品规格和价格、应用、生存状况以及存在问题等进行了系统的调研,并提出了相应的对策。2、开展了淡竹叶黄酮类化学成分的分离鉴定研究。采用大孔吸附树脂、聚酰胺、硅胶和ODS填料等分离材料,对淡竹叶黄酮类化合物进行了针对性的分离鉴定,共分离得到了7个黄酮类化合物,分别是当药黄素、日当药黄素、苜蓿素、木犀草素、木犀草苷、异牡荆苷和牡荆营。其中当药黄素是从淡竹叶中首次分离得到。3、建立了更为全面准确的淡竹叶HPLC指纹图谱。进行了多指标、客观和整体的综合评价研究,标定了20个共有峰,并对14个产地的淡竹叶样品进行了相似度评价、聚类分析和主成分分析。4、建立了HPLC法同步测定淡竹叶中7种多酚类物质含量的方法。对14个产地的淡竹叶中7种多酚类物质进行了含量测定,并进行了聚类分析,实验结果表明,主产区淡竹叶药材总体含量较高,且较稳定,能基本满足临床用药需求,部分产地间的成分及其含量差异较大。该方法快速简便,有利于对淡竹叶药材进行全面地质量评价。5、运用灰色关联度分析,探索淡竹叶次生代谢产物含量和生态因素的关系。收集产地经纬度、海拔和主导气候因子数据,对淡竹叶品质和主导气候因子进行灰色关联度分析,分析结果显示,气候因子与淡竹叶的化学成分含量关系密切,7月份平均气温对淡竹叶中黄酮类成分的累积影响最大,其次为年平均气温、降水量和1月份平均温度,无霜期和年日照时数影响较小,而其中降水量可能对有机酚酸类成分的成分影响较大。为淡竹叶适宜生长区域的选择提供了一定依据。6、对不同产地淡竹叶及其不同药用部位进行了红外光谱分析和近红外光谱分析。建立了淡竹叶红外光谱指纹图谱,采用共有峰率和变异峰率双指标序列分析法,对淡竹叶进行了产地分类。结合二阶导数图谱,可区别淡竹叶与其伪品鸭跖草、淡竹叶提取物与竹叶提取物等。此外,分别对不同产地淡竹叶中叶和茎进行了近红外光谱分析,初步探索叶和茎中成分的整体差异,并以此进行产地聚类分析比较和主成分分析。7、开展了淡竹叶中黄酮类化合物动态累积规律的初步研究。采用HPLC同步测定淡竹叶中7种多酚类成分的含量,对不同生长时期样品进行分析。实验结果表明,在淡竹叶生命周期中各成分含量总体呈上升趋势,且以抽穗后的含量较高,其中,以日当药黄素的含量变化最为明显。8、初步探讨了淡竹叶总黄酮提取物和日当药黄素对大鼠离体心脏的收缩力及心电图的作用。实验结果表明,淡竹叶总黄酮提取物可以增强正常大鼠的离体心脏收缩力,显著增加LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax指标,但不改变心率(HR),也并不能增加左室舒张末期压(LVEDP);总黄酮提取物对正常大鼠离体心脏ECG的P-R间期,QTc间期无明显影响。日当药黄素对以上指标无明显影响。本实验的开展为进一步研究淡竹叶总黄酮的药理药效提供了新的思路,也为寻找和筛选有效成分和有效配伍组分提供了依据和思路。9、观察淡竹叶总黄酮对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨可能机制。采用SD大鼠冠状动脉结扎造成心肌缺血再灌注模型,试剂盒测定血清和心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及一氧化氮(NO)水平。淡竹叶总黄酮(25,50,100mg/kg)可抑制大鼠心肌中LDH及CK的漏出,降低血清和心肌组织中LDH与CK活性,降低MDA含量,提高SOD、GSH-PX口NO浓度。淡竹叶总黄酮对大鼠缺血再灌注的心肌损伤有保护作用。