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目的心脑血管疾病是我国第一位死因的慢性病,其中以高脂血症为代表的脂质代谢紊乱是心脑血管病的重要诱因,控制高脂血症的发生发展对于预防心脑血管疾病有着重要意义。苦荞麦是我国传统的谷类食物之一,含有较多的芦丁、槲皮素等类黄酮物质,被认为具有降脂、降糖、抗氧化等作用。我们从四川省凉山出产的苦荞麦中提取苦荞黄酮,建立测定大鼠血清和脏器组织中芦丁和槲皮素的高效液相色谱法,研究苦荞麦及苦荞黄酮对实验性高脂血症大鼠的降血脂作用及其机制,为苦荞麦食品的合理应用提供理论基础。方法1.以90%乙醇在65℃水浴条件下从苦荞麦中提取苦荞黄酮。采用ODS-SPC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,粒径5um),以乙腈(B)和0.5%磷酸缓冲液(A)为流动相梯度洗脱(25%B 0～6min,25%～50%B 6～10min,50%B 10-17min, 50%～25%B 17～20min,25%B 20-25min):流速1ml/min;柱温40℃,检测波长360 nm,测定苦荞麦及苦荞黄酮、血清和组织中芦丁和槲皮素含量。2.SPF级SD成年雄性大鼠70只,10只喂饲基础饲料作为正常对照组,其余60只喂饲高脂饲料制作高脂血症模型。一周后,高脂血症模型大鼠按体重和TC随机分为6组：模型组、药物对照组、苦荞黄酮高剂量组、苦荞黄酮低剂量组、苦荞麦高剂量组、苦荞麦低剂量组。药物对照组灌胃给予2mg/kg·bw辛伐他汀(喂饲高脂饲料),苦荞黄酮低、高剂量组分别灌胃给予91.300mg/kg·bw苦荞黄酮(喂饲高脂饲料),正常对照组(喂饲基础饲料)、模型组(喂饲高脂饲料)灌胃给予等量蒸馏水。苦荞麦高剂量组喂饲含10%苦荞麦粉的高脂饲料,苦荞麦低剂量组喂饲含3.33%苦荞麦粉的高脂饲料,连续4w。每周观察大鼠体重,实验期末心脏取血并处死大鼠,离心分离血清,测定血清TG. TC.HDL-C、LDL-C。取肝脏称重,留取部分肝脏组织制备匀浆测定肝TG.TC,用RT-PCR法检测大鼠肝脏HMG-CoA还原酶(HMG-CoA reductase).胆固醇7a羟化酶(cholesterol 7a-hydroxylase,CYP7A1)和低密度脂蛋白受体(lowdensity lipoprotein receptor,LDL-R)mRNA的表达量。结果1.经HPLC检测,苦荞麦样品含芦丁1.8%,槲皮素0.2%；苦荞黄酮含芦丁60%,槲皮素6.67%。血清芦丁在0.08-25μg/ml,槲皮素在0.016～10μ∥ml范围内线性关系良好,相关系数为0.9999；芦丁和槲皮素的检测限分别为0.016μg/ml和0.004μg/ml;日内RSD分别小于7.4%和8.1%,日间RSD小于9.1%和9.0%。组织芦丁和槲皮素在0.05-8μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0.9999,肝组织芦丁和槲皮素的检测限分别为0.012μg/ml和0.004μg/ml,日内RSD分别小于7.9%和8.9%,日间RSD分别小于8.9%和7.2%,肾脏组织和小肠的芦丁和槲皮素检测限均为0.02μg/ml;血清和组织中芦丁和槲皮素的回收率均在72%以上。2.降脂动物实验结果显示,与正常对照组相比,模型对照组大鼠的体重增重,肝脏指数,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C),肝脏TG均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,苦荞黄酮及苦荞麦各剂量组大鼠血清TG. TC. LDL-C和肝脏TG值降低,血清高密低脂蛋白(HDL-C)升高,差异均具有显著性(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组动物肝脏组织中HMG-CoA mRNA表达水平显著增加,CYP7A1、LDL-RmRNA表达水平明显减少(P<0.05)；与模型组比较,苦荞黄酮、苦荞麦和药物对照组能抑制HMG-CoA mRNA的表达,增加CYP7A1、LDL-RmRNA的表达(P<0.05)。结论1.苦荞麦中苦荞黄酮含量丰富,以芦丁、槲皮素为主。HPLC方法灵敏度较高、重复性良好,操作简单、快速,可用于血清和组织中芦丁和槲皮素的分析测定。2.苦荞麦可降低高脂血症模型大鼠的血脂和肝脂水平,其作用机制可能与苦荞黄酮抑制肝脏组织中HMG-CoA mRNA的表达,上调CYP7A1、LDL-R mRNA表达水平有关。