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目的：证明Abl—Abi-1—WAVE2信号转导通路的存在并研究其在肿瘤发生发展中的作用及作用机制方法：为证明Abl—Abi-1—WAVE2信号转导通路的存在并研究其在癌细胞极化运动中的作用及作用机制，我们在以fibronectin(FN)刺激黑色素瘤B16细胞产生运动的模型中检测Abi-1／WAVE2复合物，采用定位突变法证明Abi-1与WAVE2直接结合并阐明其结合位点；以用于侵袭性研究的经典细胞系—黑色素瘤细胞系B16为研究对象，以fibronectin(FN)刺激B16细胞使之发生极化运动(生成细胞扇形伪足)为研究模型，研究Abl／Abi-1／WAVE2在细胞极化运动中的作用及对肌动蛋白聚合的影响，并用定点突变法阐明其作用机制；还采用RNA干扰技术使B16细胞中的Abi-1蛋白表达缺失，进而观察其对细胞伸展和移动的影响。为研究Abl—Abi-1—WAVE2信号转导通路在肿瘤发生发展中的作用，我们采用共聚焦显微镜观察Abl／Abi-1／WAVE2在细胞有丝分裂末期的胞质分裂过程中的定位，并采用RNA干扰技术使鼠NIH3T3细胞及人乳腺癌MCF-7细胞中的Abi-1蛋白表达缺失，观察Abi-1蛋白稳定缺失对细胞增殖的影响，并初步探讨Abi-1蛋白缺失后所引起的P53、CDC25、CDK1及CyclinB1表达的改变；采用软琼脂克隆形成实验观察MCF-7细胞Abi-1稳定缺失后细胞克隆形成情况，并用裸鼠成瘤实验检测Abi-1稳定缺失对细胞成瘤情况的影响。结果：在证明Abl—Abi-1—WAVE2信号转导通路的存在并研究其在癌细胞极化运动中的作用及作用机制部分，(1)在以fibronectin(FN)刺激黑色素瘤B16细胞产生运动的模型中检测到Abi-1／WAVE2复合物，采用定位突变法证明Abi-1的coiled-coil结构域中的特定部位直接与WAVE2 N端的WHD结构域相结合；(2)以用于侵袭性研究的经典细胞系—黑色素瘤细胞系B16为研究对象，利用fibronectin (FN)刺激黑色素瘤细胞B16产生极化运动的实验中发现，Abi-1使WAVE2由胞浆移位到细胞伪足扇形边缘，并介导肌动蛋白在该部位聚合形成膜皱褶和扁平伪足；当WAVE2的WHD结构域被去掉，则Abi-1／WAVE2的结合遭到破坏，此时Abi-1在胞浆中呈点状分布，而WAVE 2几乎全部进入细胞核，在此状态下的细胞即使接受FN刺激也不发生极化运动研究；(3) Abl存在于Abi-1／WAVE2复合物中，在细胞极化运动中，Abl／Abi-1／WAVE2与Racl和actin一起共定位于细胞头部膜边缘，用定点突变法掉WAVE2的酪氨酸磷酸化位点，表明Abi-1介导Ab1对WAVE2的Y150位点磷酸化，体外肌动蛋白聚合试验表明这种磷酸化在WAVE2活性调控中起促进作用；(4)采用RNA干扰技术使B16细胞中的Abi-1蛋白表达缺失时，WAVE2在伪足头部聚集减少，B16F1细胞伸展面积减少，且细胞膜呈毛刺状。在研究Abl-Abi-1—WAVE2信号转导通路在肿瘤发生发展中的作用部分，(1)共聚焦显微镜观察发现，Abl、Abi-1、WAVE2、CDK1以及actin共定位于细胞胞质分裂过程中的收缩环形成部位，(2)采用RNA干扰技术瞬时转染，流式细胞术检测到细胞发生G1期阻滞，且不发生明显的细胞凋亡；(3) RNA干扰使鼠NIH3T3细胞及人乳腺癌MCF-7细胞中的Abi-1蛋白稳定缺失时，可见NIH3T3和MCF-7细胞中出现明显的多倍体和异倍体细胞；(4) Abi-1蛋白缺失后所引起P53表达明显增多、CDC25表达减少、CDK1-15p表达减少，CyclinB1主要分布于多倍体细胞的胞浆中，且多倍体和异倍体细胞的Ki-67高表达；(5)软琼脂克隆形成实验表明，具有多核细胞的Abi-1缺失细胞株与对照组MCF-7细胞在软琼脂上形成的克隆数无明显差异，但95％的Abi-1稳定缺失株的克隆为多核克隆，而对照组MCF-7细胞株多核克隆不足1％；裸鼠成瘤实验表明Abi-1稳定缺失后细胞可以成瘤，且瘤体积和重量高于对照组MCF-7细胞株。结论：Abi-1与WAVE2结合并影响WAVE2在细胞中的转运和定位，从而实现WAVE2在特定部位的激活，此外还介导Abl对WAVE 2的磷酸化，这种磷酸化在WAVE2活性调控中起促进作用。Abl—Abi-1—WAVE2信号转导通路不仅在细胞运动中存在，同时还参与细胞胞质分裂过程中的收缩环形成，Abi-1蛋白稳定缺失导致可增殖性多倍体和异倍体细胞株产生。