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CIK细胞是体外扩增得到的,具有杀伤肿瘤能力的效应细胞。CIK细胞可以杀伤多种肿瘤,容易获得足够临床应用的数量；毒副作用小。这些特点都促成了CIK细胞在临床肿瘤治疗中广泛应用。然而,目前检测CIK细胞毒性的方法都是短时间的观察,CIK细胞与肿瘤共作用较长时间后,是否还具有细胞毒性还不清楚。本文观测了CIK细胞在培养的过程中,主要细胞亚群比例的变化；建立了一种新的检测CIK细胞长期抗肿瘤毒性的方法,将CIK细胞与乳腺癌细胞系SKBR3共培养最长至96h,观察CIK细胞与SKBR3的相互作用。结果显示,CIK细胞主要是CD3+T细胞,培养到d12天可达到97.67±1.24%；在体外培养诱导的过程中,主要的效应细胞群CD3+CD56+细胞和CD3+CD8+CTL细胞的比例逐渐增加。CD3+CD8+CTL细胞培养d16天达到平台期(86.43±7.17%)。在培养的过程中,跟杀伤有关的受体NKG2D,表达也是逐渐增加的,培养到d16天可达到平台期(90.3±7.14%)。CD4+CD25high调节T淋巴细胞培养到d16天所占比例为3.03±2.03%。文中新建立了一种检测CIK细胞长期抗肿瘤细胞毒性的方法。由此方法得出,CIK细胞具有长时间抑制SKBR3的生长的能力,至少在我们观察的72h之内,CIK细胞的对SKBR3具有长期毒性,这为后续的实验奠定了基础。使用CIK细胞长期毒性检测方法发现,从d12-d20天的CIK细胞的抗SKBR3活性区别不大。研究SKBR3对CIK细胞的相互作用,根据重复测量统计分析,得到SKBR3对CIK细胞增殖几乎没有影响。综合上述的结果,认为CIK细胞在培养到d14-16天收获最佳。结论：CIK细胞对SKBR3具有长期的细胞毒性,是一种有效的新型肿瘤治疗的辅助疗法。