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目的肝纤维化是由于各种急慢性炎症刺激肝脏导致损伤修复反应而产生的结果,其中,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的活化被认为是纤维化发生的中心环节,现研究已证实骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗能改善甚至逆转肝纤维化,但其具体机制尚不清楚。本研究通过用人 BMSCs(human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs)培养上清诱导HSC,观察诱导后对HSC增殖周期及表达的基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及组织抑制基质金属蛋白酶-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响。方法在无菌条件下抽取肝硬化志愿者骨髓5ml,采用密度梯度离心法分离HBMSCs,接种于25cm2塑料培养瓶中培养,收集原代培养7d的HBMSCs培养上清,加入HSC中共培养24h及48h。采用流式细胞仪观察HSC增殖周期,明胶酶谱法检测MMP-2蛋白的表达,ELISA法检测MMP-1及TIMP-1蛋白的表达、荧光实时定量PCR法检测MMP-2、TIMP-1 mRNA的表达。结果与HSC培养组相比,共培养48h组G1期细胞显著增加,S期细胞显著减少,并且明胶酶谱法显示共培养分别24h和48h后,MMP-2表达量均下降,低于HSC培养组,差异具有统计学意义(P<0.01)。ELISA法结果显示共培养24h、48h,与HSC培养24h、48h相比较,MMP-1的表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而TIMP-1的表达呈现出减少的趋势(P<0.05)。荧光实时定量PCR结果显示,HSC和HBMSCs培养上清培养24h和48h,与HSC培养24h和48h相比较,HSCMMP-2mRNA的表达明显减少(P<0.01),同时TIMP-1mRNA的表达亦呈现出显著减少的趋势(P<0.01)。结论肝硬化志愿者BMSCs有抗肝纤维化的作用,根据实验结果得出HBMSCs可以阻止HSC的活化,起到改善及治疗肝纤维化的作用,为进一步进行肝硬化患者自体BMSCs移植治疗肝硬化的运用提供了重要的理论依据。