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目的： 1.通过检测Wnt5a、β-连环蛋白(β-catenin)、蓬乱蛋白(Dishevelled, Dvl)-1的表达情况，研究Wnt/β-catenin信号通路在哮喘气道重塑中的作用; 2.探讨c-Myc、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)与Wnt/β-catenin信号通路在哮喘气道重塑中的关联性。 方法： 选取无特定病原体(specific pathogenfree，SPF)级健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠16只，年龄为8周，体重为180-200g，随机分成哮喘气道重塑组和正常对照组两组，每组大鼠各8只。哮喘气道重塑组大鼠用鸡卵清白蛋白(ovalbumin，OVA)作为致敏物，通过致敏2周、激发8周建立大鼠哮喘气道重塑模型，正常对照组大鼠相应采用生理盐水进行处理。末次激发后处死大鼠，观察肺组织大体外观，苏木精-伊红染色(hematoxylin and eosin staining，HE)染色观察两组大鼠肺组织的病理结构，采用彩色医学图像分析技术测定两组大鼠支气管管壁厚度(Wat)和支气管平滑肌厚度(wam)，免疫组织化学法检测肺组织中Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc和cyclinD1蛋白的分布和表达情况，Western blot法测定肺组织匀浆中Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc和cyclinD1蛋白的表达，采用实时荧光定量PCR法测定Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc和cyclinD1 mRNA的表达。 应用SPSS19.0软件进行数据统计分析，计量数据资料以均数±标准差（(x)±s）表示，两组样本之间的均数比较采用t检验，方差齐性检验采用Levene检验，两变量之间相关性分析采用直线相关分析法，P＜0.05表示差异有显著性。 结果： 1.光镜下显示两组大鼠肺组织病理学改变 正常对照组大鼠肺组织HE染色显示正常小气道和肺泡结构，肺组织结构完整，黏膜上皮完整，支气管管腔规则，支气管、血管周围未见炎性细胞的浸润。哮喘气道重塑组大鼠肺组织HE染色显示气道壁明显增厚，基底膜不规则增厚，黏膜褶皱增多，出现上皮杯状细胞增生和上皮细胞脱落，可见黏液腺增生、黏液栓形成和黏膜下水肿，管腔内可见渗出物和炎性细胞增多，支气管黏膜下、支气管和血管周围可见EOS、中性粒细胞和淋巴细胞等炎症细胞的广泛浸润。 2.图像分析技术测定两组大鼠支气管管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam) 哮喘气道重塑组Wat数值(62.28±5.10μm2/μm)较正常对照组(27.00±4.88μm2/μm)升高，差异显著(P＜0.01)。哮喘气道重塑组Wam数值(29.47±4.94μm2/μm)与正常对照组(12.60±1.14μm2/μm)比较，差异亦非常显著(P＜0.01)。 3.免疫组织化学方法检测Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc和cyclinD1的蛋白表达 哮喘气道重塑组大鼠肺组织Wnt5a蛋白的表达(0.30±0.04)较正常对照组(0.18±0.03)增加，差异有显著性(P＜0.01)。β-catenin蛋白在哮喘气道重塑组(0.33±0.07)中表达与正常对照组(0.19±0.03)比较，差异有显著性(P＜0.01)。正常对照组Dvl1蛋白呈少量表达(0.15±0.05)，哮喘气道重塑组可见大量Dvl1蛋白的表达(0.50±0.06)，差异有显著性(P＜0.01)。哮喘气道重塑组c-Myc蛋白(0.41±0.13)的表达与正常对照组(0.20±0.04)相比表达增加，差异有显著性(P＜0.01)。cyclinD1蛋白在哮喘气道重塑组为(0.31±0.04)的表达与正常对照组(0.15±0.03)相比亦存在显著性差异(P＜0.01)。 4.Western blot法检测Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc和cyclinD1蛋白表达 哮喘气道重塑组和正常对照组Wnt5a蛋白的相对灰度值分别为(0.47±0.01)和(0.09±0.02)，差异有显著性(P＜0.01)。哮喘气道重塑组(7.22±2.08)较正常对照组(2.06±1.01)β-catenin蛋白的表达增加，差异有显著性(P＜0.01)。哮喘气道重塑组和正常对照组Dvl1蛋白的相对灰度值分别为(0.67±0.06)和(0.20±0.43)，差异有显著性(P＜0.01)。哮喘气道重塑组肺组织c-Myc蛋白(0.21±0.05)的表达与正常对照组(0.12±0.05)相比表达明显增多(P＜0.01)。两组大鼠cyclinD1蛋白相对灰度值比较，哮喘气道重塑组(0.75±0.19)的表达与正常对照组(0.29±0.09)亦存在显著性差异(P＜0.01)。 5.荧光定量PCR法检测各组大鼠肺组织Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc、cyclinD1的mRNA表达结果 哮喘气道重塑组Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc、cyclinD1的mRNA表达结果均较正常对照组增加，差异有显著性(P＜0.01)。 6.相关性分析 ①Wat、Wam均与大鼠肺组织Wnt5a蛋白的表达(MOD值)呈显著正相关(分别为r=0.877，r=0.906，均P＜0.01，n=16)，Wat、Wam均与大鼠肺组织β-catenin蛋白的表达(MOD值)呈显著正相关(分别为r=0.821，r=0.854，均P＜0.01，n=16)，Wat、Wam均与大鼠肺组织Dvl1蛋白的表达(MOD值)呈显著正相关(分别为r=0.892, r=0.904，均P＜0.01, n=16)。 ②大鼠肺组织中Wnt5a蛋白的表达(MOD值)与β-catenin蛋白、Dvl1蛋白的表达均呈显著正相关(分别为r=0.822，r=0.920，均P＜0.01，n=16)。 ③Wat、Wam均与大鼠肺组织c-Myc蛋白的表达(MOD值)呈显著正相关(分别为r=0.787，r=0.853，均P＜0.01，n=16)，Wat、Wam均与大鼠肺组织cyclinD1蛋白的表达(MOD值)呈显著正相关(分别为r=0.917，r=0.926，均P＜0.01，n=16)。 ④大鼠肺组织中Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白的表达(MOD值)与c-Myc蛋白的表达呈显著正相关(r=0.897，r=0.808，P＜0.01，n=16)，Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白的表达与cyclinD1蛋白的表达呈显著正相关(r=0.867，r=0.807，P＜0.01，n=16)。 结论： 1.Wnt5a、β-catenin、Dvl1、c-Myc、cyclinD1参与哮喘气道重塑的形成。 2.Wnt5a参与Wnt/β-catenin信号通路的激活。 3.c-Myc、cyclin-D1可能通过Wnt/β-catenin信号通路的激活，参与气道重塑的发生和发展。