抗氟苯虫酰胺小菜蛾的转录组学和蛋白质组学研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanghuia23
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小菜蛾(Plutella xylostella L.)是鳞翅目世界性害虫,主要危害十字花科蔬菜,每年都会造成巨大的经济损失。目前小菜蛾几乎对所有化学杀虫剂都产生了抗药性。自氟苯虫酰胺问世以来,由于不合理的用药使得小菜蛾对该药剂抗药性发展迅速。为探讨小菜蛾对氟苯虫酰胺的抗性机制,本项目以敏感品系S、室内筛选的氟苯虫酰胺抗性品系Rh、田间抗性种群Rb和槲皮素处理的氟苯虫酰胺抗性品系QRh四个品系/种群为研究对象,分别利用RNA-seq和iTRAQ进行组学测序,对获得的数据进行比较分析,为揭示抗性小菜蛾的生物学特征,小菜蛾抗性和敏感品系在转录和蛋白水平上的差异,和小菜蛾对氟苯虫酰胺抗性机理研究提供有力的支持。研究结果如下:1.在前期研究的基础上,以实验室筛选的氟苯虫酰胺抗性品系,反向汰选获得4946位点为GAG纯合基因型的抗性品系,再进一步进行氟苯虫酰胺选择压抗性汰选,获得抗性倍数为1889.82倍的基因型为GAG的小菜蛾抗氟苯虫酰胺品系(Rh)。测得小菜蛾田间抗性种群(Rb)对氟苯虫酰胺的抗性倍数1250.97倍。2.通过RNA-Seq技术获得差异基因/蛋白:S-VS-Rh比较组差异基因1019个,差异蛋白168个;S-VS-Rb间差异基因1962个,差异蛋白366个;Rh-VS-Rb间差异基因2417个,差异蛋白448个;QRh-VS-Rh间差异基因597个,差异蛋白191个。3.对差异基因/蛋白进行GO富集分析和Pathway富集分析,显示差异基因/蛋白主要集中在代谢过程、催化活性、结合因子、氧化等功能和过程。4.筛选获得与抗性有关的靶标受体和解毒酶相关差异表达的基因/蛋白:RyR基因10个和蛋白1个;CYP基因51个和蛋白16个;GST基因13个和蛋白15个;CarE基因12个;酚氧化酶基因2个和蛋白5个。5.S-VS-Rh、S-VS-Rb和Rh-VS-Rb三个组间共有的表达差异显著性基因共有104个,主要集中在丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、DNA切除修复蛋白、跨膜丝氨酸蛋白酶、蛋白特异性蛋白酶、中心粒蛋白、肌球蛋白轻链、毒蕈碱型乙酰胆碱受体等。6.对差异表达蛋白进行Pathway富集分析,四个比较组间只获得代谢通路这一个显著性通路,该代谢通路包括细胞色素P450对药物的代谢和细胞色素P450对外源物质的代谢。[2.5.1.18]通路在CYP对药物和外源物质的代谢中出现频率最高,该通路包含的上调蛋白与小菜蛾氟苯虫酰胺抗性密切相关。
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