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心血管疾病一直是严重威胁人类身体健康的重大疾病之一,更是全球死亡率最高的疾病。血管钙化是一种心血管疾病,主要病理表现为血管壁僵硬,顺应性降低,易导致心肌缺血、左心室肥大和心力衰竭,会引发血栓形成、斑块破裂,是心脑血管疾病高发病率和高死亡率的重要因素之一,亦是动脉粥样硬化心血管事件、脑卒中和外周血管病发生的重要标志。许多危险因素如血脂异常、高血压、糖尿病、肾衰竭等均可能促进动脉钙化的发生。因此,血管钙化的预防和治疗成为心血管疾病研究中的重点。探究血管钙化的发生机制和有效的药物治疗是目前研究中的热点。本文通过体外实验,研究舒林酸对钙化平滑肌细胞的影响及其作用机制。在本研究中,我们主要完成了四部分工作,内容和研究结果分别是:(1)构建TGF-β1诱导的平滑肌细胞钙化模型。TGF-β1不影响平滑肌细胞活性,但会驱使收缩型平滑肌细胞具有成骨样型的分泌性、合成性特征;引起平滑肌细胞形成钙结节,产生钙沉积;同时升高ALP活性,引起OPN、BMP2、Runx2等成骨相关蛋白表达上调,引起β-catenin过表达。(2)舒林酸对平滑肌细胞细胞行为学的影响。研究结果表明舒林酸会维持平滑肌细胞的收缩性表型,1000μM的舒林酸会显著抑制平滑肌细胞的迁移,且同浓度阿托伐他汀与舒林酸比较,舒林酸具有更高的细胞安全性。(3)舒林酸抑制TGF-β1诱导的平滑肌细胞成骨分化。研究发现,舒林酸可以有效抑制TGF-β1诱导的平滑肌细胞成骨分化,维持平滑肌细胞的收缩表型,抑制增殖迁移,减少其产生的钙结节和钙沉积,降低ALP活性,下调OPN、BMP2、Runx2和β-catenin的表达。(4)舒林酸通过引起细胞自噬抑制平滑肌细胞成骨分化。研究发现,自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤会抑制舒林酸引起的平滑肌细胞自噬,同时也会抑制舒林酸对TGF-β1诱导的平滑肌细胞成骨分化的抑制作用。抑制细胞自噬,会抑制舒林酸对平滑肌细胞钙沉积、ALP活性、OPN等成骨相关蛋白的抑制效果。