低温胁迫下拟南芥差异蛋白质组学研究

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本研究以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,利用双向电泳、质谱技术并结合荧光定量PCR方法,对低温胁迫条件下的拟南芥进行了差异蛋白质组的比较分析,以探索植物的抗寒机制。实验中对蛋白质样品制备、上样方式、双向电泳参数的选择等技术环节进行了优化,建立了适合拟南芥蛋白质组学研究的技术平台。同时进行了蛋白质样品的分级制备研究,提高了低丰度蛋白的检测效果。2-DE图谱分析结果表明,在低温胁迫条件下,共检测到67个蛋白丰度差异表达变化在2倍以上的蛋白点。对其中的57个蛋白点进行了MALDI-TOF-MS分析,有42个蛋白点得到了有效鉴定,包括9个已知的低温胁迫响应蛋白和在本实验中首次发现的一些低温应答蛋白。这些蛋白在代谢、能量、防御反应等方面发挥重要作用。应用实时荧光定量PCR技术检测了其中32个蛋白在转录水平上的变化,结果显示mRNA与蛋白质水平的变化并不完全一致。
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