基于纳米材料构建均相电化学生物传感器及疾病相关蛋白质的检测应用

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疾病相关蛋白质作为生物标志物对疾病的早期诊断与治疗具有重要意义,选择合适的检测手段实现对生物标志物的半定量/定量检测是临床研究的关键。生物传感器的出现为标志物的检测提供了快速,灵敏,高效的新手段。以核酸适体作为识别工具,构建均相生物传感器,通过电化学以及紫外的分析检测方法实现对目标物质的快速,灵敏检测,为疾病的早期诊断和治疗提供了新思路新方法。本文基于纳米材料构建均相生物传感器并将其用于分析检测疾病相关的蛋白质,主要研究内容如下:一、基于三明治结构的免标记均相电化学适体传感器用于检测凝血酶将凝血酶的两条适体链分别修饰在磁珠和HAP纳米颗粒的表面用作分离探针和信号探针,当目标物质凝血酶存在于溶液中时,适体特异性识别凝血酶,在均相溶液中形成三明治结构,借助磁分离技术,将信号探针引入检测体系,实现均相电化学传感。电极表面的均相反应降低了其表面的空间位阻,提高了实验精密度和灵敏度,实现了对目标物质凝血酶的高灵敏检测,此外该传感器还具有良好的选择性,能特异性识别目标物质。二、DNA协同酶促级联反应用于均相电化学生物检测基于酶促级联反应和双重信号放大策略构建用于检测凝血酶的均相电化学生物传感器。其中DNA不仅作为识别探针来特异性结合凝血酶,提高实验的选择性,而且作为信号来源协同酶促级联反应的产物共同与底物反应生成电活性物质。在该生物传感平台中,双重信号放大策略提高了对目标物质检测的灵敏度,检出限达0.26fM,实现了对凝血酶的快速,灵敏检测。三、结合比色与电化学策略的双通道均相适体传感器用于检测凝血酶基于比色与电化学分析检测方法构建双通道均相适体传感平台用于生物检测。选择凝血酶作为模板分子,借助磁分离技术将两种信号物质分离从而实现对凝血酶的紫外和电化学方法同时检测,两种方法相互印证,提高了检测的准确性和多样性,在一个实验体系中将光学与电学结合同时用于目标物质的检测为生物检测提供了新思路。
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