【摘 要】
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目的:观察温肾消癥汤对子宫内膜异位症模型小鼠疼痛的影响,并基于COX-2/PGE2信号通路,从中枢神经系统与外周神经系统两个方向,探讨其作用机制,为温肾消癥汤临床治疗子宫内膜异位症疼痛提供实验和理论依据。方法:第一部分:建立并观察子宫内膜异位症小鼠模型的疼痛变化趋势1、随机将小鼠分为供体组、受体组和假手术组。2、建立子宫内膜异位症小鼠模型。3、造模第1天至造模第21天,每间隔3天对造模后的小鼠与假
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目的:观察温肾消癥汤对子宫内膜异位症模型小鼠疼痛的影响,并基于COX-2/PGE2信号通路,从中枢神经系统与外周神经系统两个方向,探讨其作用机制,为温肾消癥汤临床治疗子宫内膜异位症疼痛提供实验和理论依据。方法:第一部分:建立并观察子宫内膜异位症小鼠模型的疼痛变化趋势1、随机将小鼠分为供体组、受体组和假手术组。2、建立子宫内膜异位症小鼠模型。3、造模第1天至造模第21天,每间隔3天对造模后的小鼠与假手术组小鼠进行1次足部、腹部机械疼痛实验。4、造模前1天与造模后第21天,分别对造模后的小鼠与假手术组小鼠进行1次热敏实验。第二部分:评价温肾消癥汤对子宫内膜异位症模型小鼠的疼痛影响1、造模后第22天起,将造模小鼠随机分为EMS模型组、温肾消癥汤组与阳性对照组。2、分别给药,每日灌胃1次,每组小鼠连续灌胃21天:（1）温肾消癥汤组:每只小鼠灌胃0.2ml温肾消癥汤浓缩液（给药剂量为11.678g/kg）。（2）阳性对照组:每只小鼠灌胃0.2ml阿司匹林混悬剂（给药剂量为75mg/kg）。（3）EMS模型组、假手术组:每只小鼠灌胃0.2ml无菌蒸馏水。3、EMS模型组、温肾消癥汤组、阳性对照组,三组小鼠给药21天中每间隔3天进行1次足部、腹部Von Frey机械疼痛实验4、三组小鼠给药第21天进行1次热敏实验。第三部分:探究温肾消癥汤对COX-2/PGE2信号通路的影响1、给药第21天开始,每天阴道涂片确定小鼠动情周期。2、在同一动情周期处死小鼠取假手术组、EMS模型组、温肾消癥汤组、阳性对照组的血清、腹腔冲洗液（Peritoneal Fluid,PF）、组织样本（在位内膜、异位病灶（假手术组除外）丘脑、脊髓、DRG）。3、BCA测定总蛋白含量并蛋白定量。4、ELISA测定各样本中相关因子的含量:（1）COX-2/PGE2信号通路相关因子:血清、PF、在位内膜、异位病灶、丘脑、脊髓与DRG中COX-2、PGE2的含量。（2）中枢敏化相关因子:丘脑、脊髓中TRPV1的含量。（3）外周敏化相关因子:DRG中SCN11A的含量。结果:1、小鼠造模后足部与腹部痛阈第5天起逐渐降低（P＜0.05）,低于假手术组（P＜0.05）。2、温肾消癥汤组小鼠给药后,足部痛阈第17天起高于EMS模型组与阳性对照组（P＜0.05）;腹部痛阈第9天起高于EMS模型组（P＜0.05）,与阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。给药21天后,热敏痛阈明显高于给药前（P＜0.05）。3、温肾消癥汤组小鼠血清、在位内膜与PF中COX-2的水平表达低于EMS模型组小鼠（P＜0.05）,与阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。4、温肾消癥汤组小鼠血清、在位内膜与异位病灶中PGE2的水平表达低于EMS模型组小鼠（P＜0.05）,血清中PGE2水平表达低于阳性对照组（P＜0.05）,其余均与阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。5、小鼠神经系统（丘脑、脊髓、DRG）中COX-2、PGE2的水平表达低于EMS模型组小鼠（P＜0.05）,脊髓中PGE2水平表达低于阳性对照组（P＜0.05）,其余均与阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。6、温肾消癥汤组小鼠中枢神经系统（丘脑、脊髓）中TRPV1的水平明显低于EMS模型组小鼠（P＜0.05）,与阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。7、温肾消癥汤组小鼠外周神经系统（DRG）中SCN11A的水平低于EMS模型小鼠（P＜0.05）,与阳性对照组无明显差异（P＞0.05）。结论:温肾消癥汤可能通过抑制子宫内膜异位症模型小鼠体内COX-2/PGE2信号通路的过度表达,使中枢神经系统中TRPV1与周围神经中SCN11A的含量降低,抑制中枢敏化与外周敏化,达到缓解子宫内膜异位症模型小鼠疼痛的疗效。
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