目的1.观察甲型H1N1流感患儿的临床表现特点；评价云南特色中药《感冒消炎片》治疗儿童甲型H1N1流感的效果和安全性,为儿童甲型H1N1流感的治疗提供新的中药治疗方法。2.分析本地区甲型H1N1流感病毒流行株的基因组序列变异情况和遗传特征,为今后制定防治甲型H1N1流感暴发流行的综合措施及开发研制疫苗提供科学依据。方法按照病例纳入标准,收集于2009年9月至11月在昆明地区三所不同区域医院门诊就诊的儿童甲型H1N1流感疑似病例,将病例对象完全随机地分配到治疗组与对照组,分别给予治疗药物(感冒消炎片)和对照药物(银翘解毒片)治疗。详细记录病例的临床信息并进行连续随访观察,采集初次就诊时和治疗5天后的鼻咽拭子。用实时荧光定量RT-PCR方法对所采集的鼻咽拭子进行病原学检测。对甲型H1N1病毒阳性标本进行基因HA片段扩增,扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,与GenBank中甲型H1N1病毒流行病毒株进行比较,依据HA片段构建基因亲缘性关系树,分析其遗传学特征和基因组序列变异情况。采用SPSS11.5统计软件对临床和实验室数据进行统计分析。结果1.146例疑似病例中共有77例经实验室确诊为甲型H1N1流感,阳性率53%,所有诊断病例均为汉族；其中,女性40例、男性37例；两组平均年龄分别为7.12岁和6.17岁,两组间性别、年龄差别无统计学意义；77例患儿中有62例采集到治疗5天后的鼻咽试子标本,其中治疗组32例,对照组30例。2.77例患者均有发热(100%),68例有咳嗽(88%),在61例能够准确表述自身感受的患儿中,53例有咽喉痛(87%)、49例有头痛(80%)、33例有乏力(54%)、25例有肌肉酸痛(42%)、17例呕吐(23%)、9例有腹痛(15%)、15例有腹泻(19%)、1例有胸痛。77例患者中59例就诊前自行或在其它医疗机构应用抗生素,占病例的76%,部分患儿应用2种抗生素。血常规结果示14例白细胞总数升高,占总病例的19%,最高者达24.3×10~9/L；淋巴细胞比例升高者12例,占总病例的16%。6例患儿白细胞总数低于4.0×10~9/L占8%。其余血常规结果显示在正常范围。3.治疗组和对照组的用药热退时间(h)分别为13.09±7.02和22.13±15.55；咽痛缓解时间(h)为20.36±7.91和27.20±12.30；咳嗽缓解时间(h)为51.20±13.81和53.25±16.50。两组治疗效果的成组T检验结果示前两者P<0.05而后者P>0.05。4.治疗组和对照组的治疗前后甲型H1N1流感病毒荧光定量PCR检测结果比较均采用配对T检验。结果显示P<0.05,说明治疗组和对照组治疗前后呼吸道分泌物中的病毒含量比较差异有统计学意义。5.治疗组与对照组治疗后甲型H1N1流感病毒转阴率采用完全随机设计下两组频数分布的X~2检验,X~2=4.023,P=0.043,P<0.05,两组总体率之间有差别,说明两种药物在呼吸道分泌物病毒转阴方面差别有统计学意义。6.基因序列分析显示,2株分离甲型H1N1流感病毒毒株来源相同,HA节段的氨基酸序列高度同源(为99.2%),在进化树上形成紧密相连的一小簇,呈单源性的发生关系；与国内其它地区的流行株和甲型H1N1流感病毒标准株A/CALIFORNIA/04/2009(HIN1)同源性较高,而与季节性流感代表株A/BRISB ANE/59/2007(H1N1)(GENB ANK收录号为CY0302320)的同源性较低为85.1%,与美国和墨西哥暴发时的流行株在遗传进化上也相距较近。结论1.儿童感染甲型H1N1流感病毒,最常见的症状为发热、咳嗽、咽喉痛、头痛。乏力、肌肉酸痛也是常见症状。此外,腹痛、呕吐、腹泻等消化道症状也比普通上呼吸道感染多见。血像变化对指导诊断意义不大。我国在治疗上呼吸道感染性疾病中抗生素使用的情况仍较普遍。2.以云南特色中药臭灵丹为主要成份的感冒消炎片对于儿童甲型H1N1流感,显示出很好的治疗效果和安全性,能够迅速缓解流感所致的发热、咽痛等症状,未发现明显副作用,依从性很好。3.感冒消炎片与银翘解毒片相比,有更好的抗病毒作用,能够更有效降低呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒载量,加快病毒转阴。4.实验获得的2株甲型H1N1流感病毒基因序列,同源性很高,与中国内地流行株和国外标准株基本一致,变异性较低,进一步证实中国内地的流行株为输入性。