温敏性β-环糊精自组装表面的构建及其在血液净化中的应用研究

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bleachdou
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近年来,需要进行血液净化的人群日益增加,临床上对吸附血液中毒素材料的需求也日趋增大。血液中的胆红素(bilirubin,缩写为BR)浓度太高将造成高胆红素血症,高胆红素血症容易导致肝细胞黄疸或者溶血性黄疸,同时选择性影响患者的中枢神经系统,这将进一步造成脑性瘫痪、智能障碍、听力损伤和癫痫,甚至造成死亡。然而,临床上应用的吸附材料对胆红素的清除效率不高,吸附材料的成本也比较大。β-环糊精(β-CD)能够通过主客体自组装作用特异性吸附胆红素。β-环糊精也能够与金刚烷(Ad)进行主客体自组装,并且它们自组装之后形成的包结络合物(β-CD-Ad)具有温敏响应性能。针对上述胆红素吸附背景并结合β-环糊精特性,本文合成了带有巯基的金刚烷衍生物和β-环糊精二聚体,再将金刚烷接枝在金表面,通过β-环糊精和金刚烷之间的主客体自组装制备温敏响应自组装表面,用于特异性吸附胆红素,温敏性能赋予该表面可循环利用的价值。本文首先利用带巯基和N-羟基琥珀酰亚胺的PEG与金刚烷胺盐酸盐之间的反应合成了带有巯基的金刚烷衍生物HS-PEG-Ad,再利用β-环糊精单醛和1,12-十二烷胺之间的席夫碱反应合成了β-环糊精二聚体CDD。利用傅里叶红外光谱、核磁共振谱和飞行时间质谱表征了HS-PEG-Ad和CDD的结构特征。其次,通过巯基和金的反应将金刚烷衍生物HS-PEG-Ad接枝到金面上,得到Au-Ad,再通过β-环糊精中的一个环糊精和金刚烷之间的主客体自组装作用将β-环糊精二聚体接枝在表面上,得到温敏响应主客体自组装表面Au-Ad-CDD。利用X射线电子能谱(XPS)、接触角测量仪和原子力显微镜(AFM)表征了表面的制备。并用石英晶体微天平QCM-D实时监控了HS-PEG-Ad和CDD接枝于表面从而得到Au-Ad和Au-Ad-CDD的过程、胆红素的特异性吸附过程以及表面的温敏响应性能,得到Au-Ad-CDD对胆红素的吸附是Au-Ad的1.7倍,并且能够在37-45°C之间循环吸附胆红素。最后,利用QCM-D实时监控人血清白蛋白HSA和纤维蛋白原Fg在表面的吸附情况,与Au、Au-Ad相比,发现Au-Ad-CDD对蛋白质的吸附明显减少,提高了抗蛋白质非特异性吸附性能;体外血小板粘附实验中,通过SEM观察粘附在表面上血小板的形貌,发现Au-Ad-CDD表面粘附的血小板数量少,且都属于失活状态,表明Au-Ad-CDD具有抗血小板粘附性能;利用溶血性实验和红细胞形貌观察分析表面对红细胞的影响,发现Au-Ad-CDD的溶血率只有0.42±2.21%,红细胞保持凹形饼状的活性结构,不会造成溶血效应,满足临床要求;利用浸提液CCK8法评估材料的细胞毒性,发现Au-Ad-CDD具有良好的生物相容性。上述体系有望通过点击反应应用于高胆红素血症的临床治疗,降低治疗成本。
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