成纤维样滑膜细胞（FLSs）作为类风湿关节炎（RA）的最终效应细胞,其活化后具有增生和入侵性,可以破坏软骨及骨组织,是导致关节功能障碍最直接的因素。目前RA的治疗主要集中于炎症因子抑制与免疫抑制,针对FLSs增生的治疗相对较少,而且相关治疗药物毒副作用较大。为了提高治疗效率,我们拟通过炎症因子抑制剂英夫利昔单抗（INF）及化疗药物甲氨蝶呤（MTX）协同作用,彻底抑制FLSs增生。为进一步降低药物全身性毒性,我们构建以Fe₃O₄纳米粒为基础的药物载体,利用其光热效应实现药物的定位释放,而光热治疗同时将与化疗产生协同抗RA效果。在靶向纳米载体设计中,面临“尺寸效应”、“PEG困境”等问题,我们首先通过实验优化了靶向RA组织的最佳Fe₃O₄纳米粒尺寸,并考察RA光热治疗（PTT）的可行性。在此基础上,负载INF、MTX,构建MTX-Fe₃O₄-S-PEG-INF纳米载体,该载体在NIR激光下实现HS-PEG-INF的胞外智能脱落,有助于纳米粒的细胞摄取。同时,Fe₃O₄的pH敏感性将促进MTX在酸性环境下释放。在PTT的配合下,达到抑制炎症因子和杀伤增生细胞的目的。本项目不仅为RA的治疗做了有益的尝试,也为光热治疗的应用提供了新的思路。具体内容如下:一、探索RA靶向制剂的最佳粒径尺寸,开发具有明确粒径（70,110,220,350 nm）和相同表面性质的Fe₃O₄纳米粒作为模型纳米粒。制备的Fe₃O₄纳米粒具有良好的生物相容性,在NIR激光照射下表现出较高的NIR‐温度响应。在与炎性细胞一起孵育时观察到尺寸依赖性内化现象,与大粒径相比,小尺寸Fe₃O₄纳米粒更容易被吞噬,导致体外更高的细胞毒性。然而,CIA模型小鼠体内实验表明,与其他尺寸的纳米粒相比,Fe₃O₄-220 nm更易于积累在发炎的关节,并可在NIR激光照射下在RA病灶诱发更高的温度响应和更好的PTT效果。二、基于RA靶向的最优粒径,设计NIR/pH智能响应MTX-Fe₃O₄-S-PEG-INF载药纳米粒以实现联合治疗效应,即联合PTT实现INF在细胞外抑制TNF-α和细胞毒性药物MTX胞内递送杀伤增生性FLSs。INF通过可热裂解的铁-硫（Fe-S）连接键锚定在Fe₃O₄纳米粒上,响应NIR激光照射,断裂Fe-S键,INF可以在空间和时间上高度准确地释放。在解除空间位阻效应后,Fe₃O₄-MTX纳米内核易于与细胞膜融合而通过溶酶体途径被FLSs内化,在酸性环境中通过酸解而自我牺牲,以在FLSs内释放相当多的MTX。实现了INF、MTX和光热消融三者协同作用杀伤增生性FLSs。三、MTX-Fe₃O₄-S-PEG-INF载药纳米粒的体内抗RA效果。在体内生物分布结果指导下,研究了NIR/pH双敏感MTX-Fe₃O₄-S-PEG-INF载药纳米粒扭转RA疾病进程的效果。结果表明,MTX-Fe₃O₄-S-PEG-INF用于CIA模型实现了INF-MTX-PTT三者协同增强抗RA效果,疗效明显优于单一治疗模式。