冬虫夏草菌丝体中腺苷的提取纯化及甘露醇检测方法的比较

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本论文的研究共分为三个:(1)冬虫夏草中腺苷的检测及热水浸提工艺的优化;(2)冬虫夏草中腺苷的分离纯化及鉴定;(3)冬虫夏草中甘露醇的含量测定及方法比较。主要结论有:(1)采用反相C18柱对冬虫夏草菌丝体中腺苷含量进行测定,确定检测条件为:甲醇/水=15/85的体系为流动相,流速1mL/min,紫外检测器260 nm波长处检测,进样量10μL。测得冬虫草夏菌丝体中腺苷含量为2.13mg/g。采用响应面法对冬虫夏草菌丝体中腺苷的热水浸提工艺进行优化,得到最佳提取条件为:提取温度41℃,料液比1:50,提取时间4 h,在此条件下,腺苷的理论得率为2.170 mg/g,实际得率为2.104 mg/g,比较误差为3.04%。(2)采用超声辅助热水浸提—醇沉除大分子物质—液液萃取—半制备液相色谱仪分离一系列手段结合分离纯化腺苷。最终得到白色粉末状固体制备物。采用HPLC、MS-MS、高分辨MS、H-NMR等手段对制备物进行鉴定分析,结果均与腺苷相吻合。最终得到的制备物确为目标物质腺苷。(3)采用比色法和HPLC法分别对冬虫夏草菌丝体中的甘露醇含量进行测定。比色法测得原料中甘露醇含量为4.98%,HPLC法测得结果为4.41%,存在一定偏差,可能是比色法受到杂质干扰,造成前者测定结果偏高。两种方法各有优缺点,可根据实际情况选择合适方法用于甘露醇的测定。
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