食源性致病菌数量控制是食品检测过程中的一个关键环节。近年来,ATP荧光检测技术作为微生物数量预警与筛查指标已应用在食品领域、医疗卫生领域等方面。本论文是以8种常见食源性致病菌为研究对象,主要研究了 ATP荧光技术检测食源性致病菌的适用性、致病菌ATP含量差异对荧光技术影响的显著性和该技术连续实时检测微生物含量的实用性,旨在为提高ATP荧光技术的准确性提供理论基础。同时基于ATP发光原理提出ATP荧光检测笔设计方案,结合配制的两种选择性培养基以达到便携、快速、初步定性检测致病菌的目的。具体研究内容如下:(1)本文以ATP生物发光法为主,辅以平板菌落计数法,构建8种常见食源性致病菌菌落浓度与对应发光强度的数学模型,并比对分析各菌种间ATP含量差异,进而评价生物发光法进行致病菌计数的可靠性。结果显示:8种致病菌工作曲线的线性相关系数是,除肠致病性大肠埃希氏菌为0.8612外,其余均大于0.93,即对应关系良好,并且对于同一荧光值,不同种属致病菌所含菌落总数差异不显著(P>0.05)。综合实验数据:ATP生物荧光技术可定量预测8种致病菌数量,并可忽略种属差异对此技术计数的影响,这为ATP荧光技术在食品质量安全的应用提供了理论支撑。(2)选取3种致病菌为研究对象,基于ATP生物发光原理,构建3种致病菌各生长阶段菌落浓度与荧光强度的标准曲线,并探究4个生长阶段各致病菌胞内ATP含量变化。分析发现3种食源性致病菌各自不同生长阶段ATP含量差异对菌落计数影响极显著(P<0.01),即在实际应用中,不可将单一生长时期所建的标准曲线作为检测标准,应对特定样品进行多次重复测定建立相应的数学模型进行分析。(3)通过单因素实验优化ATP提取剂种类及裂解时间,并应用生物发光法结合平板计数法建立三种食物放置不同时间微生物数量与对应发光强度随时间变化的动态曲线。结果显示:(1)在室温条件下,采用表面活性剂CTAB,浓度0.03%,裂解3min(细菌)、4min (霉菌),提取微生物ATP效果最佳;(2)对三种食物进行人工接种实验,发现微生物浓度对数值与荧光值对数值呈良好的线性关系,分别为0.953 (猪肉)、0.959 (牛奶)、0.962 (花生);即ATP生物发光法可实现快速、实时、连续检测食品中微生物含量。(4)设计并制备一种同时富集肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌和副溶血弧菌的复合共增菌培养基(SSVP),同时在共增培养基基础上添加特定抑菌剂和控制增菌时间来制备选择性培养基以达到初步区分4种致病菌的目的。结果表明:(1)SSVP对非目标菌具有不同程度的抑制作用,4种目标菌在单增菌和混合增菌中初始接种浓度为1CFU/mL时,分别培养8h增菌浓度大于104CFU/mL。(2) SSVP-硫代硫酸钠、SSVP-萘啶酮酸培养基分别作为肠炎沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的选择性培养基,可将增菌时间分别控制在16h、12h,这期间高浓度背景菌(接种浓度103CFU/mL)处于延滞阶段,而低浓度目标菌(接种浓度1CFU/mL)可达到最大限度增菌(107～108CFU/mL)。SSVP可快速特异性富集4种食源性致病菌,同时设计的两种选择性培养基避免其它竞争菌快速增菌,初步达到定性检测目标菌的目的。同时论文以模块化为基础提出ATP荧光检测笔系统设计方案,结合上述培养基,有望设计出适合民用和商用的ATP荧光检测笔。总之,ATP荧光检测技术作为一种简便有效的微生物计数方法,可在一定程度取代平板菌落计数法快速、准确地评估食品的品质及其安全性。