子宫内膜异位症(endometripsis, EMs)是指具有生长功能的子宫内膜组织(腺体和间质)在子宫腔被覆内膜以外的部位生长、浸润、扩散、转移、复发等表现,引起疼痛和不育等。EMs是生育年龄妇女的常见病,近年来发病率不断上升,且青少年及绝育后妇女发病率也逐渐上升。1860年,临床上首次发现内异症,至今,虽有众多学者研究,但发病机制仍不清楚,造成对此病治疗的困难。因此对内异症发病机制的深入研究非常有必要。目前,Sampson的经血逆流种植学说仍为内异症发病机制主导理论,但近年来研究认为,经血逆流只是发生内异症的诱因,内异症的发生与免疫异常有关,甚至有人提出,EMs是自身免疫性疾病。树突状细胞(dendritic cell, DC)是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞(antigen presenting cell, APC),参与抗原识别、加工处理和递呈,在免疫应答诱导中,具有独特地位。DC的功能具有双重性,既能选择性地诱导免疫应答,又可以在一定条件下诱导免疫耐受。研究显示,DC所处的免疫状态与其成熟状态有关。在DC分化发育中,可以分为未成熟型DC及成熟型DC。未成熟型DC能够诱导CD4+T细胞形成,自身及CD4+T细胞可大量分泌免疫抑制性细胞因子IL-10,使免疫应答向耐受方向发展；成熟型DC诱导T细胞的增殖,促使IL-6大量分泌,促进细胞介导的免疫应答,导致盆腔局部粘连、纤维化和免疫学异常。研究显示,DC广泛参与机体免疫、炎症、肿瘤免疫、移植排斥、应急反应等生理及病理过程。当DC数量发生减少,或者二者比例失衡,将引起一系列免疫相关性疾病,如：哮喘、自身结缔组织性疾病、肠炎、恶性肿瘤等,已经引起人们的高度重视。目前,国内外关于DC在EMs发病及疾病进展机制的研究甚少。从脐带血提取的单核细胞在一定条件(GM-CSF+IL-4)培养下,大部分可分化成树突状细胞,小部分化为巨噬细胞。本课题通过研究不同期别EMs腹腔液对上述过程的影响,以及此过程与腹腔液中IL-10和IL-6水平的关系,来进一步阐明内异症不同疾病程度的免疫状态,探讨内异症的免疫治疗提供理论依据。目的：研究不同临床期别的内异症腹腔液(ePF)对脐带血单核细胞分化为树突状细胞的影响；研究ePF中细胞因子IL-6和IL-10水平的差异,以及培养后上清液中IL-6和IL-10水平的改变,探讨其在不同临床期别内异症发生及疾病发展中的作用。方法：1.本研究选择2008年7月至2009年12月间于山西医科大学第二医院妇产科住院的30例内异症患者作为实验组(EMsⅠ-Ⅱ期组、EMsⅢ-Ⅳ期组各15例),取同期住院的子宫肌瘤患者15例为对照组,收集所有研究对象的腹腔液,一般资料,包括患者年龄、临床分期等。2.采集2009年1月至2009年4月间于山西医科大学第二医院产科正常分娩的新生儿脐带血,分离单核细胞。3.以ePF对单核细胞在加入细胞因子(GM-CSF+IL-4)的培养进行干预,采用倒置相差显微镜动态观察不同临床期别的ePF对DC的分化的影响；采用流式细胞仪检测培养7天后DC表面表达CDla和CD83细胞所占比例；采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELSIA)检测腹腔液中和DC培养上清中IL-6和IL-10水平的变化。结果：1.ePF对单核细胞分化为DC的影响依内异症临床期别的不同而存在差异1.1培养24h后,实验组和对照组细胞形态无显著差异,均为培养皿内散在的细胞聚体,体积较小,绝大多数为圆形,以贴壁细胞为主,仅有少量的半悬浮细胞。且在培养的3-5天,实验组和对照组细胞形态均无显著差异。1.2培养第7天末,对照组中,悬浮的簇状细胞越来越多,细胞体积较大,可见细胞表面有毛刺状或并指状突起；而ePF组中,悬浮的簇状细胞少,贴壁细胞多,细胞量少,主要为巨噬细胞形态,细胞体积较小,胞质中偶有颗粒或空泡,其中EMsⅢ-Ⅳ期组较Ⅰ-Ⅱ期组更明显。1.3对培养前,细胞表面所表达的CDla和CD83分别进行测定的结果显示：新鲜分离的单核细胞中CDla细胞比例低；培养后第3天和第7天各组CDla细胞比例升高；组间比较,EMsⅠ-Ⅱ期组表达CDla的细胞比例低于cPF组和EMsⅢ-Ⅳ期组,差异有显著性(P<0.05),EMsⅢ-Ⅳ期组与cPF组无显著性差异(P>0.05)。培养后第3天和第7天CD83细胞比例组内比较有升高,差异有显著性(P<0.05)；而组间比较,EMsⅢ-Ⅳ期组高于EMsⅠ-Ⅱ期组和对照组,差异有显著性(P<0.05)；EMsⅠ-Ⅱ期组低于对照组,但差异无显著性(P>0.05)。2.ePF中IL-10的水平与内异症临床分期的关系及在培养后上清液中水平的变化2.1培养前腹腔液中IL-10水平Ⅰ-Ⅱ期组较cPF组高,但二者比较差异无显著性(P》0.05)；Ⅲ-Ⅳ期组较cPF组低,二者比较差异无显著性(P>0.05),Ⅰ-Ⅱ期组高于Ⅲ-Ⅳ期组,二者差异无显著性(P>0.05)。2.2培养7天后,上清液中IL-10水平,Ⅰ-Ⅱ期组较培养前升高,差异有显著性(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ期组较培养前变化不明显(P>0.05)；cPF组较培养前稍升高,差异无显著性(P>0.05)。组间比较,Ⅰ-Ⅱ期组高于Ⅲ-Ⅳ期组和cPF组,差异有显著性(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ期组较cPF组低,但差异无显著性(P>0.05)。3. ePF中IL-6的水平与内异症临床分期的关系及在培养后上清液中水平的变化3.1培养前腹腔液中IL-6水平Ⅰ-Ⅱ期组和Ⅲ-Ⅳ期组均高于cPF组,差异有显著性(P<0.05)。3.2培养7天后,各组IL-6水平均较培养前升高,Ⅰ-Ⅱ期组升高较培养前比较无差异(P>0.05)；Ⅲ-Ⅳ期较培养前升高差异有显著性(P<0.05),cPF组较培养前升高差异无显著性(P>0.05)。培养后,各ePF组IL-6水平均较cPF组高,差异有显著性(P<0.05)；ePF组中Ⅲ-Ⅳ期较Ⅰ-Ⅱ期组高,有显著差异(P<0.05)。结论：1.EMs各组腹腔液使单核细胞分化为DC的数目较对照组低；其中Ⅰ-Ⅱ期EMs腹腔液培养的DC多为非成熟型,而Ⅲ-Ⅳ期EMs腹腔液培养的DC多为成熟型。2.在腹腔液干扰DC的分化中,Ⅰ-Ⅱ期EMs患者腹腔液中IL-10浓度的升高,提示早期内异症局部免疫环境处于抑制状态,从而有利于异位的子宫内膜逃脱免疫监控,在腹腔继续存活,并生长、种植到盆腔其他脏器。3.Ⅲ-Ⅳ期EMs患者腹腔液中含有较高水平的IL-6,且在培养后IL-6水平增高,提示中、重度内异症局部免疫环境处于激活状态,从而增加了周围组织的粘连。