目的：构建TGF-β应答元件真核表达载体pGLuc-TRE-Mini-TK,BMP应答元件真核表达载体GLuc-(BRE)2-Mini-TK和pGLuc-9×(GCCG)-Mini-TK,为实现筛选与纤维化密切相关的转录因子,进行干预性靶向治疗纤维化的目的奠定实验基础。 　　方法：通过分子生物学技术设计TGF-β/BMP应答元件,并构建相应真核表达载体pGluc-TRE-Mini-TK、pGluc-(BRE)2-Mini-TK和pGluc-9×(GCCG)-Mini-TK。然后通过脂质体分别将pGluc-TRE-Mini-TK转染到小鼠成纤维L929细胞内,并采用持续活化型受体激活素受体样激酶5 (activin receptor-like kinase 5, ALK-5)激活含有TGF-β应答元件细胞的TGF-β信号；将pGluc-(BRE)2-Mini-TK和pGluc-9×(GCCG)-Mini-TK分别转染到大鼠HSC-T6细胞内,用ALK-3激活含有BMP应答元件细胞的BMP信号。然后通过荧光检测技术检测培养细胞上清中的Gluc表达情况,以确认TGF-β/BMP应答元件的功能。 　　结果：(1) 酶切鉴定和测序分析证实TGF-β/BMP应答元件TRE、(BRE)2以及9×(GCCG) 碱基序列、插入方向和阅读框架均正确。(2) 将TGF-β/BMP应答元件真核表达载体分别转染入相应细胞后,经免疫荧光检测,可见培养上清中荧光素酶GLuc大量表达。 　　结论：本研究成功构建了TGF-β/BMP应答元件表达载体。为实现筛选与纤维化密切相关的转录因子,进行干预性靶向治疗纤维化的目的奠定实验基础。