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目的:通过聚合酶链反应偶联印迹杂交和酶联放大技术(即:三联放大技术)与荧光定量PCR在血清中检测乙型肝炎病毒的比较,探索适用于血液筛查HBV的核酸检测技术。
方法:综合聚合酶链反应的高敏感性及印迹杂交和酶联免疫技术的高特异性建立三联放大技术,通过检测HBV定值标准血清,评估三联放大技术检测血清HBVDNA。然后对医院肝病门诊患者195份血清样本,平行进行三联放大技术检测和荧光定量PCR检测,并将三联放大技术与荧光定量PCR检测HBVDNA检出率进行比较。
结果:三联放大技术HBV检测体系对90IU/ml的HBV标准血清检出率为100%,对45IU/ml的HBV标准血清检出率为75%。对195份门诊患者血清标本,经三联放大技术检出125例,检出率64.10%;而FQ-PCR检出103例,检出率52.82%。两种检测方法的差异有统计学意义(P<0.001),即三联放大技术对HBVDNA检出率高于荧光定量PCR。
结论:通过三联放大技术与FQ-PCR对血清HBV检测比较,三联放大技术有较高检测灵敏度,能明显提高HBVDNA的检出率,可运用于血液筛查乙型肝炎病毒。