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仔猪的断奶应激,往往导致肠道形态改变,消化吸收能力下降,饲料摄入量减少,同时也可能导致炎症和氧化应激发生,而这些都与小肠的基础组成-小肠上皮细胞-的增殖分化相关。研究证明饲料中必需的维生素E(VE)对肠道功能有影响,但VE是否影响肠道黏膜中肠道上皮细胞的增殖分化以及影响机制尚不明确。本文以21日龄断奶仔猪为试验对象,通过研究VE对断奶仔猪小肠黏膜形态结构、消化酶活性、营养物质转运的影响,并通过qPCR、免疫组化和WB等手段进一步研究VE对仔猪小肠上皮细胞增殖分化的影响及其内在机制。试验1:将:24头21日龄断奶三元仔猪(杜×长×大)随机分为4组,每组6头仔猪,单栏饲养,分别饲喂添加16IU,32IU,80IU和160IU的维生素E日粮。试验期为7天,记录每天的采食量,分别于试验开始前、开始后第7天各称重一次。试验2:将30头21日龄断奶三元仔猪(杜×长×大)随机分为5组,每组6头仔猪,单栏饲养,分别饲喂添加0IU,16IU,32IU,80IU和160IU的维生素E日粮。试验期为14天,记录每天的采食量,分别于试验开始前、开始后第14天各称重一次。结果:(1)对生长性能、肠道消化转运功能和血液生化指标的影响:试验第7天,VE有增加平均日增重和日采食量的趋势(0.05<P<0.1)。试验第7天,十二指肠和空肠部分指标有影响趋势(0.05<P<0.1);试验第14天,添加VE有降低隐窝深度的趋势(0.05<P<0.1),空肠绒毛宽度显著降低(P<0.05)。试验第7天,添加32IU的VE显著提高空肠黏膜乳糖酶和碱性磷酸酶酶活(P<0.05);试验第14天,与对照组相比,蔗糖酶浓度随VE浓度的升高而降低(P<0.05)。前7天的处理使VE浓度升高对断奶仔猪肠道空肠黏膜谷氨酸转运体Slc1a1的表达有显著降低再升高的影响(P<0.05)。试验第7天,VE使胆固醇显著升高(P<0.05),对血液中谷草转氨酶、低密度脂蛋白胆固醇和血糖的浓度在有升高趋势(0.05<P<0.1),而NH3L的浓度在同一VE浓度处理下显著降低(P<0.05)。处理14天时,ALT浓度显著升高(P<0.05),IgM的浓度显著降低(P<0.05)。(2)对肠道上皮细胞增殖的影响与抗氧化、信号通路的关系,对杯状细胞分化的影响:第14天,80IU VE组隐窝细胞增殖数目显著低于对照组(P<0.05)。试验第7天,空肠黏膜中的丙二醛MDA在80IU VE组的含量显著低于其他浓度(P<0.05),而第14天有升高的趋势(P<0.1)。试验第7天和第14天,VE都显著提高Ctnnb1的表达(P<0.05),而前7天Notch1的表达显著升高(P<0.05);到第14天,Dll1的表达对比其他组,在32IU的组显著下降(P<0.05)。试验第7天,空肠隐窝中的杯状细胞数量随VE浓度升高而增加(P<0.05),回肠绒毛的杯状细胞数量随VE浓度升高而降低;试验第14天,添加80IU VE显著升高回肠绒毛中的杯状细胞(P<0.05),对隐窝中的杯状细胞有降低趋势(0.05<P<0.1)。(3)对空肠回肠炎症因子表达的影响:试验第7天,空肠炎症因子Il-1b和Tnf-a的表达在饲喂32IU浓度的VE时有高于其他浓度VE处理组的趋势(0.05<P<0.1)。而在处理14天时,Il-22和Tnf-a相比对照组,被显著降低了mRNA的表达量(P<0.05),而Il-10的表达量被显著升高(P<0.05)。第7天,Tff3的mRNA表达在16IU显著低于其他高浓度的VE处理组(P<0.05),而Fasn的表达在此浓度的表达显著高于其他组(P<0.05)。Muc2的mRNA表达在最高浓度160IU时低于其他浓度(P<0.05),Tlr4的表达随VE浓度的升高而显著升高(P<0.05)。第14天的Scd表达在32IU时最高,VE对其表达有影响趋势(P>0.1)。Il-22及Tlr2的mRNA表达量在同一浓度--16IU组的表达量分别显著上升(P<0.05)和产生上升趋势(P<0.1)。Il-1B和Tnf-a的表达在浓度为32IU的组分别显著升高(P<0.05)和有趋势(P<0.1)。结论:日粮中添加VE能够影响断奶仔猪肠道形态结构和功能,并通过影响抗炎因子的表达抑制空肠上皮细胞的增殖;通过影响促炎因子和脂质代谢基因的表达影响杯状细胞的分化。