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谷氨酸(glutamate, Glu)是中枢神经系统中一类重要的兴奋性神经递质,通过激活谷氨酸受体(glutamate receptors, GluRs)发挥作用。Glu过度激活其受体所引起的兴奋性神经毒性在神经损伤的发生中具有重要作用。近年来一些研究者注意到在中枢神经系统外的外周非神经组织也广泛存在GluRs的表达,但它们的生理及病理意义远未阐明。本研究室的前期研究发现,亲离子型谷氨酸受体中的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的激活可以通过促进中性粒细胞与血管内皮细胞之间的黏附而加重急性肺损伤。但代谢型谷氨酸受体在此过程中有何影响未见报道。本实验通过观察Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(group I metabotropic glutamate receptor, mGluRⅠ)在中性粒细胞与内皮细胞上的表达,以及该受体的激活对中性粒细胞与内皮细胞黏附的影响,并对其可能机制进行研究,为深入研究肺脏等外周组织中谷氨酸受体的生理及病理意义,拓展肺部疾病机制及防治的研究提供新的思路。方法:取健康人新鲜静脉血Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离中性粒细胞,培养人正常脐静脉内皮细胞(human normal umbilical vein endothelial cells, HUVE-12),免疫细胞化学法和Realtime-PCR法检测中性粒细胞和内皮细胞mGluRⅠ(包括mGluR1和mGluR5)的表达,分别应用不同浓度,不同时间的mGluRⅠ的特异性激动剂S-3,5-二羟基苯甘氨酸(S-3,5-dihydroxy-phenylglycine, S-DHPG)处理中性粒细胞和内皮细胞,通过比色法检测中性粒细胞和内皮细胞的黏附率,采用流式细胞技术测定中性粒细胞黏附分子CDlla和内皮细胞黏附分子ICAM-1表达的变化。结果:1.中性粒细胞和内皮细胞中有mGluRⅠ的:mGluR1和mGluR5的mRNA和蛋白表达。2.S-DHPG在10-8~10-6 mol/L浓度范围内作用于中性粒细胞呈剂量依赖性提高中性粒细胞与内皮细胞之间的黏附率(P<0.05或P<0.01);10-6mol/L的S-DHPG单独作用于中性粒细胞0.5h,即可促进中性粒细胞黏附于内皮细胞(P<0.01);随着作用时间的延长,中性粒细胞黏附于内皮细胞的比率并不随之增加;10-6 mol/L的S-DHPG单独作用于中性粒细胞可促CDlla表达(P<0.01);mGluRⅠ拮抗剂(RS)-a-甲基-4-羧基苯甘氨酸[(RS)-alpha-methyl-4-carboxyphenylglycine,(±)-MCPG]0.5 mmol/L可以显著阻断激动剂S-DHPG(10-6 mol/L,1 h)的促黏附及促CDlla表达效应(P<0.01)。3.S-DHPG在10-8~10-6 mol/L浓度范围内作用于内皮细胞呈剂量依赖性提高中性粒细胞与内皮细胞之间的黏附率(P<0.05或P<0.01);10"6 mol/L的S-DHPG单独作用于内皮细胞0.5h,即可促进中性粒细胞黏附于内皮细胞(P<0.01);随着作用时间的延长,中性粒细胞黏附于内皮细胞的比率并不随之增加;10-6 mol/L的S-DHPG单独作用于内皮细胞可促ICAM-1表达(P<0.01);mGluRⅠ拮抗剂(±)-MCPG(0.5 mmol/L)可以显著阻断激动剂S-DHPG(10-6 mol/L,1h)的促黏附效应及促ICAM-1表达效应(P<0.01)。结论:1.中性粒细胞和内皮细胞均可表达mGluR1/5受体。2.中性粒细胞膜上mGluRⅠ的激活可促进中性粒细胞与内皮细胞的相互黏附,其机制可能与上调中性粒细胞表面黏附分子CDlla的表达有关。3.内皮细胞膜上mGluRⅠ的激活可促进中性粒细胞与内皮细胞的相互黏附,其机制可能与上调内皮细胞表面黏附分子ICAM-1的表达有关。