海带岩藻聚糖超滤提取技术及岩藻聚糖抗菌活性的研究

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岩藻聚糖是一种水溶性杂多糖,存在于褐藻细胞间组织和一些软体动物体内,组成成分较为复杂,其含有的主要单糖组分为L-岩藻糖,还含有糖醛酸、半乳糖、木糖、葡萄糖等组分,根据来源的不同和生长环境的差异,这些组分的含量也收到很大影响。最新研究结果显示,岩藻聚糖是一种具有生物活性的多糖,其抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗凝血等活性皆已被报道,且其生物活性与分子量的大小、单糖组分的连接方式、空间结构和硫酸基团的含量及其与多糖的结合位点均有关系。抗生素是现在临床医疗中常用的药物之一。随着应用范围的不断延伸和药物种类的不断开发,使用抗生素带来的问题日益严重,多种抗生素的耐药性已达到100%。因此,开发天然、无抗药性、低毒副作用的抗菌药物成为科研领域研究热点。本文以海带为原料,利用超滤系统分离纯化岩藻聚糖,将所得的多糖用于制备低分子量岩藻聚糖和抑菌实验,初步探讨分子量和硫酸基团含量对抑菌活性的影响,主要研究结果如下:本文选取福建省海域人工养殖海带为研究对象,经烘干、粉碎过80目筛。以料液比1:30在4℃下浸提5 h,4000 r/min高速冷冻离心,取上清液调pH至2,4000 r/min冷冻离心除去褐藻酸,去除的褐藻酸的量占海带粉的16.71%;调pH至中性,补足蒸馏水,在4℃下利用50 kDa超滤膜组件在0.2 MPa下超滤浓缩,浓缩液用乙醇沉淀,沉淀物经冷冻干燥得到多糖样品。多糖的得率为2.32%,岩藻聚糖含量56.64%,硫酸基团含量21.49%,糖醛酸的含量为12.78%。低分子量岩藻聚糖的制备工艺研究。利用酸水解和超声波辅助过氧化氢降解制备低分子量的岩藻聚糖,结果显示:岩藻聚糖经脱重金属后硫酸基团含量得到提高;利用超声波辅助过氧化氢降解的多糖组分硫酸基团保留较好,硫酸基团脱落率小于10%,远远优于使用传统的酸水解降解得到的岩藻聚糖。此外,经降解后的多糖溶液的粘度也会随之下降。研究了脱除重金属、降解前后和降解方法对岩藻聚糖抑菌活性的影响。降解后的岩藻聚糖对DPPH自由基和羟自由基的的清除效果更好;在抑制微生物生长的实验中,选取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌3种受试菌,实验结果显示,只有经超声波辅助过氧化氢降解后的岩藻聚糖表现出抑菌活性,抑菌效果极为显著,具有替代抗生素的潜力。岩藻聚糖中络合的重金属离子对生物活性有抑制作用;岩藻聚糖经降解以后,其生物活性明显得到提高;超声波辅助过氧化氢降解的岩藻聚糖的活性高于酸水解降解的多糖。
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