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人神经母细胞瘤是一种由新生儿的神经嵴衍生的肿瘤，它是发生在儿童中的一种最常见的实体瘤。但与其他的人类肿瘤相比，神经母细胞瘤也是自发衰退率最高的肿瘤之一。SH-SY5Y细胞是人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH中的一个克隆，它是研究神经细胞终末分化的一个极有用的模型。 细胞分化往往会引起细胞内一系列分子事件的改变，进而影响细胞对一些凋亡刺激敏感性的改变。早期文献报道，分化细胞中Bcl2的高表达可以使分化细胞对一些药物刺激不敏感。HSP90是一个重要的分子伴侣，参与细胞增殖、凋亡、分化等重要的生物学过程。为了探讨HSP90在SH-SY5Y细胞的分化与凋亡中是否也发挥关键作用，本研究检测了未分化的与RA诱导的分化的SH-SY5Y细胞对热休克和GA两种刺激的不同反应。其中热休克是HSP90潜在的诱导剂，而GA是HSP90功能的特异抑制剂。结果表明，热休克(45℃，30min)诱导SH-SY5Y细胞发生少量的凋亡。流式细胞仪检测、Hoechst 33258核染分析及PARP降解分析显示，与未分化细胞相比，分化细胞对同样条件的热休克更为敏感，凋亡细胞的比例明显增加。竞争性RT-PCR方法和Western blot结果显示，热休克诱导SH-SY5Y细胞中hsp90α mRNA和蛋白水平增加。分化细胞内hsp90α mRNA的水平比正常细胞大为增加，热休克处理后其水平不再继续升高。热休克也诱导了Akt及三种MAPK激酶：ERK，JNK，p38磷酸化水平以及转录因子c-Jun和c-Fos表达水平的升高，但降低了Bcl2的表达。 MTT、Hoechst 33258核染分析及PARP降解分析发现，GA呈剂量依赖性诱导SH-SY5Y细胞凋亡，分化细胞对同样剂量的GA处理不是很敏感。Western blot结果显示，SH-SY5Y细胞在GA处理后，细胞内Akt和ERK磷酸化的水平均明显降低，c-Jun和c-Fos的表达也明显降低，Bcl2的表达没有明显改变。同时，GA也诱导p53发生大量的核聚集。分化细胞内Akt和ERK磷酸化水平以及c-Jun、c-Fos和Bcl2的表达水平均比未分化细胞高，所以分化细胞在GA处理后细胞内这些蛋白的表达均比未分化细胞要高。Western印迹分析和免疫荧光分析显示，分化细胞中p53的核聚集不如未分化细胞明显。