论文部分内容阅读
本试验以取自一年生水曲柳(FraxinusmandshuricaRupr.)的带项芽和带腋芽茎段为外植体进行离体培养,研究其适宜的灭菌方法、基本培养基种类和激素对腋芽萌发、丛芽产生和增殖的影响,并首次通过腋芽增殖途径获得了水曲柳丛生苗并诱导生根,为今后开发一套适合于水曲柳快速离体扩繁的技术打下了基础。
通过对不同月份取材的一年生水曲柳带芽茎段和一年生水曲柳超级苗带芽茎段及无菌苗带芽茎段的培养,结果表明,5月至6月间取幼嫩的苗桩萌芽为外植体灭菌效果较好,污染率低(6~10%);以水培超级苗萌芽茎段灭菌效果最好,污染率低于6.5%。幼嫩茎段灭菌以用0.05%HgCl2处理2min最好。接种方式竖插优于横放。带腋芽茎段优于带顶芽茎段。通过对四种培养基(WPM、MS、DKW、1/2MS)、3种细胞分裂素(BA、TDZ、2ip)、及不同蔗糖浓度对腋芽萌发效果的对比,认为WPM+BA8.0mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7.0g/L的组合最适合腋芽萌发,萌发率达100%。
在腋芽萌发过程中,试图用高压静电场处理促进萌发和增殖,但结果表明0~150kv/m范围内的场强处理30~90min对腋芽萌发有促进作用,但其导致褐化严重,降低了成活率。
在腋芽增殖研究中,以带1~2个腋芽的茎段为外植体在WPM基本培养基上反复继代增殖。统计结果表明,0.1mg/L的NAA配合1.0mg/L的ZT对腋芽增殖效果最好,腋芽的增生率可达到90%,增殖系数达2.75。
水曲柳无菌苗生根相对容易,通常采取直接生根方式进行。生长素的添加对水曲柳的生根起决定作用,细胞分裂素对水曲柳的生根有抑制作用。NAA比IBA诱导生根效果好,在NAA0.5mg/L时,达到最大生根率65.4%。生根苗容易诱导成活。