灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)野生敏感菌株XY6-1S经紫外线、亚硝基胍及腐霉利诱导产生高抗腐霉利菌株XY6-1R052、XY6-1R140和XY6-1R202,其EC50和MIC分别大于100μg/ml和1000μg/ml,这些抗腐霉利菌株对同类杀菌剂异菌脲和有机磷类杀菌剂甲基立枯磷都有正交互抗性。经比较研究,抗腐霉利菌株在无药和含药培养基上的产孢量明显低于敏感菌株,但产菌核能力除抗性菌株XY6-1R140丧失外,则差异不大。一定浓度(0.5~4μg/ml)腐霉利处理后,敏感菌株菌丝分支短小、细胞肿胀、顶端膨大,甚至菌丝扭曲、破裂,原生质外渗,而抗性菌株菌丝形态没有明显影响。本研究表明,无论在高糖(蔗糖)还是高盐(NaCl)培养基上,腐霉利抗性菌株菌丝生长均比敏感菌株差,这表明抗腐霉利菌株对高渗透压比较敏感。此外,抗性菌株菌丝相对电导率明显高于敏感菌株。这显示抗腐霉利菌株细胞膜透性发生了改变,因而对高渗透压敏感,且在短时间内渗出较多电解质。试验还发现,在含药培养液中腐霉利敏感菌株菌丝内甘油合成大量增加和积累,其中XY6-1S甘油含量增加904.63%,而抗性菌株菌丝内甘油含量增加40%左右或有所下降。这表明抗性菌株应对外界渗透压的调节能力要低于敏感菌株。根据已发表的灰葡萄孢组氨酸激酶基因BcOS-1序列设计特异引物,经PCR扩增和测序,获得腐霉利敏感菌株XY6-1S和抗性菌株XY6-1R052、XY6-1R140、XY6-1R202组氨酸激酶基因序列全长共5675 bp,cDNA长3948 bp,编码1315 aa。其中保守区域有2180 bp,cDNA1857 bp,编码619 aa;非保守区域有3495bp,cDNA 2091 bp,编码696 aa。与BcOS-1相比,腐霉利抗感菌株组氨酸激酶基因序列有5个碱基即编码的3个氨基酸和2个内含子有所不同。如:在保守区域第1744位碱基前者为A,编码丝氨酸(Ser),后者为G,编码丙氨酸(Ala);第2502位碱基前者为A,后者为C,但该碱基为内含子。在非保守区域第3332位碱基前者为C,编码脯氨酸(Pro),而后者为T,编码亮氨酸(Leu);第4153位碱基前者为G,编码丙氨酸(Ala),而后者为A ,编码苏氨酸(Thr);第4316位碱基为内含子,前者为C,而后者为T。但是,腐霉利抗感菌株组氨酸激酶基因碱基序列均完全相同,这表明我国灰葡萄孢对腐霉利的抗性与组氨酸激酶基因(保守区域和非保守区域)的碱基突变无关。因此,我国灰葡萄孢抗腐霉利等二甲酰亚胺类杀菌剂的分子机制尚不清楚,其高渗敏感性和抗药性可能另有原因。