一株鞘氨醇单胞菌对多环芳烃的降解特性及菲降解途径研究

被引量 : 0次 | 上传用户:kn4281
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
多环芳烃是一类在环境中有广泛分布的有机化学污染物,具有“三致”性(致畸、致突变、致癌),通过食物链的传递会对生态环境和人体健康造成极大危害。微生物修复是消除PAHs污染的有效方式。研究降解菌的遗传控制、探索代谢途径、解析相关酶系和功能基因,从而构建基因工程菌株用于污染环境的生物修复是当前研究的热点。本论文对一株筛选自厦门博坦油码头表层海水的高效菲降解细菌Sphingomonas sp.H的生理生化特征、对PAHs的降解特性、降解条件、降解关键酶基因、差异表达蛋白质组等方面进行了较为系统的研究,获得的主要结果如下:1.降解能力测定显示,鞘氨醇单胞菌H能以菲和荧蒽作为唯一碳源生长,并能利用PAHs代谢途径中的中间产物,包括2—萘酚、水杨酸、邻苯二酚、苯酚和原儿茶酸。利用均匀设计对鞘氨醇单胞菌H降解菲的条件进行优化,DPS软件数据处理系统分析表明在接种量OD600为0.5,菲起始浓度为498.467 mg L-1,降解时间为47.099 h时,降解速率最大为8.104 mgL(-1(h-1,降解率可达76.6%。2.通过引物设计的方法,从鞘氨醇单胞菌H中扩增得到全长的邻苯二酚-2,3-双加氧酶基因(C230),从分子生物学角度证明了PAHs降解过程中的重要酶系邻苯二酚-2,3-双加氧酶(C230)在鞘氨醇单胞菌H中的存在。对C230基因构建了重组表达载体,成功在表达宿主大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行表达,基因在宿主中以溶解蛋白和包涵体形式同时存在。可以进一步推断鞘氨醇单胞菌H降解菲的基本途径是在C230的作用下经由水杨酸途径问位裂解(meta-cleavage)苯环,生成2-羟基粘康酸半醛(2-HMS),从而降解菲。3.采用2-DE(双向凝胶电泳)结合LC-MS/MS(串联质谱),研究鞘氨醇单胞菌H在菲诱导与无菲诱导(对照)状况下的蛋白质表达,对差异蛋白的生物质谱结果进行分析,得到多个代谢途径中的关键酶(加氧酶、脱氢酶、醛缩酶等),结合鞘氨醇单胞菌H的降解特性与降解基因的研究结果,最终推导出鞘氨醇单胞菌H降解菲较为完整的代谢途径。
其他文献
本文从研究欠发达地区的县域经济发展着手,比较系统地论述了县域经济的基本含义,阐述了县域经济的基本特征和评价指标体系的构建,对欠发达地区县域经济的落后因素进行了分析,
我国现行的民办教育规范性法律文件在许多方面都存在不同程度的冲突,明显破坏了法制的统一性、权威性和实效性。其中,"非营利"概念界定的立法缺失,"合理回报"的法律性质在现
随着城市经济的迅猛发展,城市人口的剧增,造成城市地面交通的拥挤,为了缓解或者从根本上解决这个问题,开发城市地下空间势在必行,地铁这种方便快捷的公共交通工具应运而生,然
张爱玲的长篇小说《半生缘》淋漓尽致地真实展现了一个生活在父权宗法社会中的"吃人者",在长期焦虑的折磨下最终变成"吃人者",她心灵的扭曲,人性的裂变所产生的破坏力。本文
贫困代际传递是反贫困的一个重要挑战,通过强化与创新儿童发展政策的介入对于打破贫困陷阱具有积极的作用。本文基于陕西省白水县的问卷调查数据,从资产社会政策的视角出发分
本文研究的大庆市水利规划设计研究院是一个小型科技企业,一方面它正处于历史发展的最好时期,国家的可持续发展需要水利事业的支撑和保障,而规划设计工作又是水利事业的基石;
股份合作制是以合作制为基础,结合股份制的一些做法,实行劳动联合和资本联合的有机结合,劳动民主和股份民主的有机结合,按劳分配和按股分配的有机结合,实行合作经营、占有股份、权
从汉代开始,就有佛经的外文翻译。当时担任翻译的是懂外文又懂汉文的僧人。之后东南亚各国与中国的交往日趋密切,他们纷纷派人来中国学习政治组织体制和礼仪文化,此时语言的
目的设计围手术期风险防范思维导图,探讨其在预防围手术期风险因素中的效果。方法通过成立研究小组,设计围手术期风险思维导图,对14个外科护理单元和2个手术室的护理人员进行
洪水调节计算了起调水位980 m方案和984 m方案,每种起调水位方案又分为2001年汛前库容曲线方案和2002—2006年平均库容曲线方案。该文推荐汛限水位984 m,采用2001年实测库容