益生物质对秀丽隐杆线虫活力影响的研究

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双歧杆菌胞外多糖和α-乳白蛋白是两类较为常见的益生物质,秀丽隐杆线虫是一种在功能评价中应用广泛的模式动物。本研究以秀丽隐杆线虫为模式动物,探究双歧杆菌胞外多糖与乳白蛋白的功能特性与作用。首先从动物双歧杆菌BA-6(Bifidobacterium.animalis subsp.Lactis,BA-6)发酵得到粗胞外多糖并纯化;其次,使用纯牛奶通过酶凝-超滤法提取得到高纯度的α-乳白蛋白;然后,在甘油冷冻保护液中添加不同浓度的双歧杆菌胞外多糖,分析比较了双歧杆菌胞外多糖对秀丽隐杆线虫在不同冷冻保藏时间存活率的影响,进而讨论双歧杆菌胞外多糖对线虫抗逆性的影响;然后,在大肠杆菌OP50菌液中添加不同浓度的α-乳白蛋白,通过秀丽隐杆线虫的平均寿命、生殖能力和运动能力等相关指标的检测,分析α-乳白蛋白对秀丽隐杆线虫寿命以及有关重要生理指标的影响,其研究结果如下。1)双歧杆菌胞外多糖的添加可以显著地延长线虫的冷冻保藏时间,且呈现出明显的浓度依赖性。优化组合为:多糖用量40 mg/L,保藏温度-80℃,保存60 d,存活率(43.22±1.13)%,解冻后转移到NGM(Nematode Growth Medium)培养基上线虫可以正常生长发育;2)α-乳白蛋白可以有效延长秀丽隐杆线虫寿命并增强其繁殖力和运动能力。α-乳白蛋白添加量为45 mg/L时,与对照组相比,线虫寿命增加到26.33±0.72 d(增幅59.40%,P<0.05);秀丽隐杆线虫的运动能力也有显著加强,平均运动速率达到149±0.82次/min(增幅19.20%,P<0.05);线虫平均弯曲度达到了17±1.63次/20s(增幅54.54%,P<0.05)。但是当α-乳白蛋白添加量为30 mg/L时,平均产卵数相比对照组增加到236.33±12.23个(增幅53.25%,P<0.05)。线虫运动能力会随着衰老而减退。但是α-乳白蛋白可以有效减缓这一过程。综上所述,双歧杆菌能有效提高秀丽隐杆线虫抗逆性,具体表现为线虫冷冻保藏的时间延长;α-乳白蛋白不仅能够延长线虫寿命,还能提高线虫的运动能力、生殖能力并延缓衰老以及衰老带来的生理机能减退。
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