不同启动子在昆虫杆状病毒表达系统中的活性研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:fjlmh
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本研究利用对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的ie1启动子及其截短的mie1启动子、杆状病毒ETL启动子及其加长的mETL启动子以及杆状病毒多角体启动子PPH,构建了含有不同启动子控制下的EGFP报告基因的重组杆状病毒,并用其分别感染SD昆虫细胞,利用流式细胞术检测报告基因的表达水平。 结果表明,WSSV的ie1启动子和杆状病毒的mETL启动子在昆虫SD细胞中都在感染早期具有较强的启动子活性,能够控制报告基因早期高效表达,该启动子为杆状病毒表达载体在基因治疗以及非复制型载体疫苗方面的深入研究奠定了基础,具有重要的应用价值。而启动子PPH在感染后期才表现较强活性,表现出晚期启动子的特征,当蛋白产量出现峰值时,细胞却由于病毒感染而即将死亡。 本研究还发现,杆状病毒同源重复区(hr1)与极晚期启动子相互作用,在其它病毒因子的参与下,可以增强ETL启动子的活性,具有增强子的作用。
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