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肿瘤的发病机制和机体抗肿瘤免疫效应一直是肿瘤免疫研究热点。人类白细胞抗原(HLA)在抗原递呈及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肿瘤细胞的识别过程中起关键作用,其中肿瘤细胞HLA I类分子表达下调或丢失是肿瘤细胞逃逸机体免疫监视的重要机制之一。研究已发现在头颈部肿瘤、乳腺癌、肺癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌和黑色素瘤中存在不同程度的HLA I类分子表达的降低和缺失。本研究探讨了肝癌组织标本中HLA I类分子相关基因及蛋白的表达情况,并分析它们与临床资料间的关联性。为研究肝癌中HLA I类及相关分子的异常表达机制提供理论依据;同时还分析了肝癌细胞株中DNA甲基化与HLA I类分子异常表达的相关性。应用RT-PCR技术检测新鲜收取的肝癌和癌旁组织标本中HLA I类及相关加工分子基因表达情况;用HLA分子相关单抗,采用Western Blot及免疫组化技术检测肝癌组织中HLA I类分子重链蛋白及HLA I类分子复合物的表达情况,统计分析各相关基因和分子表达之间的关联性及其与临床资料的相关性。采用MSP技术对8株肝癌细胞系和1株肝癌癌旁细胞系的HLA I类分子重链A、B、C位点启动子区域CpG岛的甲基化状态进行分析。研究结果表明:应用半定量RT-PCR技术对36例新鲜肝癌组织及相对应癌旁组织中HLA-A、HLA-B、HLA-C、β2m、TAP-1、TAP-2、Tapasin的基因表达进行分析,癌与癌旁相比较(T/N),各基因的表达呈上调趋势,在研究的标本中上调率分别为:47%、47%、53%、36%、44%、47%、28%,且各基因表达有显著的相关性(x2=17.63,p=0.1274)。应用精确概率统计法与临床资料相比较显示各基因表达上调与病人年龄、肿瘤大小、病理分级、是否感染乙肝病毒及丙肝病毒无显著相关性。进一步用Western Blot及免疫组化技术分析肝癌组织及相对应癌旁组织中HLA I类分子重链蛋白HLA-A、HLA-B/C及HLA I类分子复合物的表达,其表达上调趋势依然明显。上调率分别为:47%、42%、43%。用spearman等级相关分析,HLA I类复合物和相关基因的表达有显著相关性(p<0.05)。在8株肝癌细胞系中HLA I类分子重链A、C位点启动子区域CpG岛存在甲基化;将启动子区域的DNA甲基化与相关基因表达数据相比较显示二者没有关联性;在RNA干扰DNA甲基化转移酶3a或3b的肝癌细胞系SMMC7721中,比较基因干扰前后HLA I类分子重链蛋白表达无显著变化。以上研究结果提示:在肝癌组织中HLA I类分子存在着不同于其它肿瘤的异常表达模式,表达上调的比率较高。在转录水平对肝癌中HLA I类分子重链、轻链及相关加工分子基因的研究显示其表达较之癌旁有显著上调趋势,各基因表达呈高度相关性。对HLA I类分子复合物及重链蛋白的研究进一步证实肝癌中HLA I类分子上调趋势的存在,且HLA I类分子异常表达在转录水平和蛋白水平上存在显著的相关性,因此推测肝癌中对HLA I类分子异常表达的调控可能发生在相关基因转录之前。在研究的肝癌细胞系中HLA I类分子重链A、C位点启动子区域CpG岛存在甲基化,但并没有发现DNA甲基化与HLA I类分子基因表达相关性的证据,因此推测DNA甲基化没有参与调控肝癌中HLA I类分子的异常表达。