器官移植受者由于既往输血、多次妊娠及移植史造成患者接触主要组织相容性抗原,产生同种异体抗体即为致敏受者。由同种异体抗体介导器官移植超急性排斥反应及急性排斥反应是导致移植物失功及影响移植物远期存活的重要原因,且一旦产生同种异体抗体,致敏患者体内抗体长期维持高水平并难以清除,故致敏受者的脱敏治疗成为移植领域的难点问题。本研究的目的在于,通过清髓性同种系大鼠间骨髓移植,模仿同源性骨髓移植的机制,清除致敏大鼠的体液免疫记忆,去除维持体内同种异体抗体水平的免疫学机制,从而达到脱敏的目的,降低术前体内同种异体抗体水平减少术后抗体介导的排斥反应的发生,为临床致敏患者的脱敏治疗提供新的理论依据及可行性方案。第一部分大鼠抗体介导的肾移植排斥反应模型的构建目的通过DA大鼠皮肤移植给Lewis大鼠使大鼠致敏,监测致敏后近远期受者抗供者特异性抗体水平变化,构建抗体介导大鼠肾移植排斥反应模型。方法根据大鼠是否致敏及不同免疫抑制剂治疗方案,分为以下五组:(1)Lewis-Lewis(非致敏)同种系移植组;(2)DA-Lewis(非致敏)无治疗组;(3)DA-Lewis(非致敏)他可莫司(1 mg/kg/天)治疗组;(4)DA-Lewis(致敏)无治疗组;(5)DA-Lewis(致敏)他可莫司(1mg/kg/天)治疗组。每组n=6,比较每组大鼠术后生存及组织病理学变化。结果(1)皮肤移植致敏后,抗供体特异性抗体IgM在致敏后1周达峰值,其后逐渐下降至基线水平,IgG在致敏后4周达峰值,并长期维持一定高水平。(2)在非致敏的受者大鼠一定量免疫抑制剂他可莫司(1mg/kg/天×1周),可以预防急性排斥反应的发生,维持大鼠的长期存活,而不能有效防治抗体介导的排斥反应,不能延长致敏大鼠肾移植后的存活时间。(3)抗体介导的排斥反应具有特异性的组织病理学改变。第二部分大鼠同种系骨髓移植模型的构建目的在Lewis GFP(+)雄性与Lewis Wide Type雌性大鼠之间进行同种系骨髓移植。方法根据全身照射剂量的不同,分为以下两组:(1)半致死剂量照射组(4cGy);(2)致死剂量照射组(11cGy)。每组n=6,观察两组大鼠的体重变化,使用流式细胞术及PCR的方法,监测不同时期外周血及淋巴器官中供者来源细胞的基因的情况。结果(1)两组大鼠骨髓移植后均可成活。(2)致死剂量照射组大鼠骨髓移植术后体重减轻较半致死剂量照射组明显。(3)致死剂量照射组大鼠骨髓移植后,受者大鼠外周血中供者来源细胞达95%以上且术后3月后转为稳定;半致死剂量照射组大鼠骨髓移植后,受者大鼠外周血中供者来源细胞达30%左右,并随时间延长有减少的趋势。(4)致死剂量照射受者大鼠,淋巴器官中淋巴细胞90%以上。第三部分同种系骨髓移植对致敏大鼠脱敏治疗方案的研究目的研究同种系骨髓移植对致敏大鼠脱敏治疗方案。方法将Lewis GFP(+)大鼠骨髓移植至经致死剂量照射皮肤致敏的Lewis Wide Type大鼠,根据不同的移植方案,分为以下两组:(1)Lewis GFP(+)—致敏1月Wide Type Lewis—2月后,肾移植术后使用他可莫司1mg/kg/天。(2)致敏3月后,DA—Lewis肾移植术后使用他可莫司1mg/kg/天。结果(1)同种系骨髓移植后2个月抗供体特异性抗体水平下降77.29%,与对照组有明显差别(p<0.01)。(2)脱敏治疗组大鼠术后生存与非脱敏治疗组相比得到了明显的改善(p＜0.01)。(3)脱敏治疗大鼠术后超急性抗体介导排斥反应的发生较非脱敏治疗组得到改善。(4)脱敏治疗组大鼠肾移植术后血中同种异体抗体IgG水平有术前比较未见明显变化(未出现反弹)结论通过清髓性同系大鼠间的骨髓移植可以重建受者的免疫系统,有效降低致敏受者体内同种异体抗体水平从而抑制抗体介导的排斥反应的发生。